This content is Free Access.
Capítulos
- 00:00Título
- 02:56Plating of Cells and Treatment with BMP
- 04:12Fixation and Permeabilization
- 05:26Blocking and Primary Antibodies Application
- 06:49The Proximity Ligation Assay (PLA)
- 09:54Preparation for Imaging
- 10:56In Situ Proximity Ligation Assay Results from Neuro2a Cells Treated with BMP4
- 12:18Conclusion
Hier zeigen wir, wie Proximity Ligation Assay (PLA), mit einer Kombination von Antikörpern zu verwenden, um Bone Morphogenetic Protein (BMP)-Signalisierung in fixierten Zellen sichtbar zu machen. Diese Technik erlaubt es uns, die nukleare Anreicherung von endogenen BMP aktivierten Effektor-Komplexe folgen und zu quantifizieren, ihre Werte im Laufe der Zeit unter BMP4 Stimulation.
Tags
DetectionSignaling Effector-complexesBMP4In Situ PLAProximity Ligation AssayBMP ReceptorsSmad1/5/8 EffectorsSmad4NucleusTranscription FactorsTraditional Immuno-fluorescence TechniquesPhospho-Smad PeptidesSensitivityHigh BackgroundGross QuantificationAntibody SignalIntensityPhotosensitive FluorescentProtein InteractionsSpecificityAmplification Of DNA SurrogateLocalized SignalSpotsRecognition EventMeasurement
