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Chromatographie d'affinité lipidique des vésicules médiée utilisant magnétique tri cellulaire activé (LIMACS): une nouvelle méthode pour analyser les interactions protéines-lipides
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Lipid Vesicle-mediated Affinity Chromatography using Magnetic Activated Cell Sorting (LIMACS): a Novel Method to Analyze Protein-lipid Interaction
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Chromatographie d'affinité lipidique des vésicules médiée utilisant magnétique tri cellulaire activé (LIMACS): une nouvelle méthode pour analyser les interactions protéines-lipides

DOI:
10.3791/2657-v

•

07:33 min

•

April 26, 2011

•

1Institute of Molecular Medicine and Genetics,Georgia Health Sciences University

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:00Introduction
  • 01:42Preparation of Lipid Vesicles and aPKC Binding Assays
  • 04:28In vitro Lipid-protein Polarity Complex
  • 06:10LIMACS Purification of PKCζ-EGFP and the Ceramide Binding Domain C20ζ -EGFP
  • 06:59Conclusion

Summary

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Pour tester l'interaction d'une protéine avec ses cibles lipidiques nous avons utilisé MACS et l'annexine V conjuguée à des billes magnétiques et les vésicules lipidiques synthétisées à partir des lipides cible et l'annexine V-contraignante phosphatidylsérine. Protéines liées à l'lipidiques cibles sont co-purifiés et analysés après élution à partir des perles.

Tags

Lipid Vesicle-mediated Affinity ChromatographyLIMACSProtein-lipid InteractionPurificationLipid ELISAPlasmon Resonance SpectroscopyMicrodomain StructuresLipid Binding PropertiesLipid VesiclesTarget LipidPhosphatidylserineAnnexin V MACSMagnetic BeadsCell LysateCo-purificationRecombinant Proteins

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