Name: Modello murino di endometriosi chirurgicamente indotto da Auto-trapianto di tessuto uterino (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Impara a indurre endometriosi nel topo mediante auto-trapianto chirurgico di tessuto uterino sul mesentere intestinale. Questo modello murino consente di studiare le lesioni endometrioidi e valutare nuove terapie.

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Un ringraziamento speciale a Chris Kassotis e Audrey Bailey per la revisione critica di questo manoscritto e il Dr. Scott Korte, Giuseppe Beeman, Alison Curfman, Paul Kimball, Bridget Neibreggue, Jacob Redel, Amy Schroder, Maija Steinberg, e Stacey Winkeler per la loro assistenza per l&#39;ottimizzazione di questo modello nel nostro laboratorio. Il finanziamento è stato fornito dalla formazione di Grant Clinica Biodetectives (NIH T90) (Kep), Università del Missouri Scienze della Vita Undergraduate Research Program Opportunità, MU Research Council, MU Assegni di ricerca Board e NIH R21HD056441 (SCN).

<ol><li>Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%3A+cost+estimates+and+methodological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Endometriosis: cost estimates and methodological perspective.</a> Hum. Reprod. Update. 13, 395-404 (2007).</li>
<li>Grummer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+endometriosis+research%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Animal models in endometriosis research.</a> Hum. Reprod. Update. 12, 641-649 (2006).</li>
<li>Vernon, M. W., Wilson, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+surgical+induction+of+endometriosis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Studies on the surgical induction of endometriosis in the rat.</a> Fertil. Steril. 44, 684-694 (1985).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+endometriosis+in+mice%3A+a+new+model+sensitive+to+estrogen%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Induction of endometriosis in mice: a new model sensitive to estrogen.</a> Reprod. Toxicol. 9, 233-238 (1995).</li>
<li>Pelch, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aberrant+gene+expression+profile+in+a+mouse+model+of+endometriosis+mirrors+that+observed+in+women%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Aberrant gene expression profile in a mouse model of endometriosis mirrors that observed in women.</a> Fertil. Steril. 93, 1615-1627 (2010).</li>
<li>Flores, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+of+experimental+endometriosis+identified+gene+expression+patterns+in+common+with+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling of experimental endometriosis identified gene expression patterns in common with human disease.</a> Fertil. Steril. 87, 1180-1199 (2007).</li>
<li>Giudice, L. C., Kao, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Endometriosis.</a> Lancet. 364, 1789-1799 (2004).</li>
<li>Lin, Y. J., Lai, L. ei, Y, H., Wing, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+and+macrophages+promote+angiogenesis+in+the+early+stage+of+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Neutrophils and macrophages promote angiogenesis in the early stage of endometriosis in a mouse model.</a> Endocrinology. 147, 1278-1286 (2006).</li>
<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intact+progesterone+receptors+are+essential+to+counteract+the+proliferative+effect+of+estradiol+in+a+genetically+engineered+mouse+model+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Intact progesterone receptors are essential to counteract the proliferative effect of estradiol in a genetically engineered mouse model of endometriosis.</a> Fertil. Steril. 82, 673-678 (2004).</li>
<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+or+enzymatic+disruption+of+aromatase+inhibits+the+growth+of+ectopic+uterine+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Genetic or enzymatic disruption of aromatase inhibits the growth of ectopic uterine tissue.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 87, 3460-3466 (2002).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L., Birnbaum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promotion+of+endometriosis+by+2%2C3%2C7%2C8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin+in+rats+and+mice%3A+time-dose+dependence+and+species+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Promotion of endometriosis by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin in rats and mice: time-dose dependence and species comparison.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 138, 131-139 (1996).</li>
<li>Foster, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+characteristics+of+endometriosis+in+the+mouse+model%3A+application+to+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Physiol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Morphologic characteristics of endometriosis in the mouse model: application to toxicology.</a> Can. J. Physiol. Pharmacol. 75, 1188-1196 (1997).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+surgically+induced+endometriosis+on+pregnancy+and+effect+of+pregnancy+and+lactation+on+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Soc.+Exp.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of surgically induced endometriosis on pregnancy and effect of pregnancy and lactation on endometriosis in mice.</a> Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 212, 332-337 (1996).</li>
<li>Lu, Y., Nie, J., Liu, X., Zheng, Y., Guo, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trichostatin+A%2C+a+histone+deacetylase+inhibitor%2C+reduces+lesion+growth+and+hyperalgesia+in+experimentally+induced+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Trichostatin A, a histone deacetylase inhibitor, reduces lesion growth and hyperalgesia in experimentally induced endometriosis in mice.</a> Hum. Reprod. 25, 1014-1025 (2010).</li>
<li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li>
<li>Whitten, W. K., Bronson, F. H., Greenstein, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrus-inducing+pheromone+of+male+mice%3A+transport+by+movement+of+air%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Estrus-inducing pheromone of male mice: transport by movement of air.</a> Science. 161, 584-585 (1968).</li>
<li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rodent+estrous+cycle%3A+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Birth.+Defects.+Res.+B.+Dev.+Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth. Defects. Res. B. Dev. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586-e2586 (2011).</li>
<li>Moen, M. H., Halvorsen, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histologic+confirmation+of+endometriosis+in+different+peritoneal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Obstet.+Gynecol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Histologic confirmation of endometriosis in different peritoneal lesions.</a> Acta. Obstet. Gynecol. Scand. 71, 337-342 (1992).</li>
<li>Cummings, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methoxychlor+as+a+model+for+environmental+estrogens%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methoxychlor as a model for environmental estrogens.</a> Crit. Rev. Toxicol. 27, 367-379 (1997).</li>
<li>Fowler, R. E., Edwards, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+superovulation+and+pregnancy+in+mature+mice+by+gonadotrophins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Induction of superovulation and pregnancy in mature mice by gonadotrophins.</a> J. Endocrinol. 15, 374-384 (1957).</li>
<li>Wilson, E. D., Zarrow, M. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+superovulation+in+the+immature+mouse+and+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reprod.+Fertil%22%5BJournal%5D)">Comparison of superovulation in the immature mouse and rat.</a> J. Reprod. Fertil. 3, 148-158 (1962).</li>
<li>Lee, B., Du, H., Taylor, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+murine+endometriosis+induces+DNA+methylation+and+altered+gene+expression+in+eutopic+endometrium%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Experimental murine endometriosis induces DNA methylation and altered gene expression in eutopic endometrium.</a> Biol. Reprod. 80, 79-85 (2009).</li>
<li>Somigliana, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometrial+ability+to+implant+in+ectopic+sites+can+be+prevented+by+interleukin-12+in+a+murine+model+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometrial ability to implant in ectopic sites can be prevented by interleukin-12 in a murine model of endometriosis.</a> Hum. Reprod. 14, 2944-2950 (1999).</li>
<li>Hirata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+experimental+model+of+endometriosis+using+mice+that+ubiquitously+express+green+fluorescent+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Development of an experimental model of endometriosis using mice that ubiquitously express green fluorescent protein.</a> Hum. Reprod. 20, 2092-2096 (2005).</li>
<li>Story, L., Kennedy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+studies+in+endometriosis%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ilar.+J%22%5BJournal%5D)">Animal studies in endometriosis: a review.</a> Ilar. J. 45, 132-138 (2004).</li>
<li>Cummings, A. M., Hedge, J. M., Birnbaum, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+prenatal+exposure+to+TCDD+on+the+promotion+of+endometriotic+lesion+growth+by+TCDD+in+adult+female+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of prenatal exposure to TCDD on the promotion of endometriotic lesion growth by TCDD in adult female rats and mice.</a> Toxicol. Sci. 52, 45-49 (1999).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+estrogen%2C+progesterone%2C+and+methoxychlor+on+surgically+induced+endometriosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effects of estrogen, progesterone, and methoxychlor on surgically induced endometriosis in rats.</a> Fundam. Appl. Toxicol. 27, 287-290 (1995).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriotic+lesions+synthesize+and+secrete+a+haptoglobin-like+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometriotic lesions synthesize and secrete a haptoglobin-like protein.</a> Biol. Reprod. 58, 988-994 (1998).</li>
<li>Yavuz, E., Oktem, M., Esinler, I., Toru, S. A., Zeyneloglu, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genistein+causes+regression+of+endometriotic+implants+in+the+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Genistein causes regression of endometriotic implants in the rat model.</a> Fertil. Steril. 88, 1129-1134 (2007).</li>
<li>Dmitrieva, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+involvement+in+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid involvement in endometriosis.</a> Pain. 151, 703-710 (2010).</li>
<li>Efstathiou, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsteroidal+antiinflammatory+drugs+differentially+suppress+endometriosis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model.</a> Fertil. Steril. 83, 171-181 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endostatin+inhibits+the+growth+of+endometriotic+lesions+but+does+not+affect+fertility%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Endostatin inhibits the growth of endometriotic lesions but does not affect fertility.</a> Fertil. Steril. 84, Suppl 2. 1144-1155 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+synthetic+endostatin+peptides+inhibit+endothelial+migration+in+vitro+and+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Short synthetic endostatin peptides inhibit endothelial migration in vitro and endometriosis in a mouse model.</a> Fertil. Steril. 85, 71-77 (2006).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+rats+as+a+research+model+for+the+study+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Using rats as a research model for the study of endometriosis.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 955, 318-327 (2002).</li>
<li>Stilley, J. A., Woods-Marshall, R., Sutovsky, M., Sutovsky, P., Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+Fecundity+in+Female+Rats+with+Surgically+Induced+Endometriosis+and+in+Their+Daughters%3A+A+Potential+Role+for+Tissue+Inhibitors+of+Metalloproteinase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Reduced Fecundity in Female Rats with Surgically Induced Endometriosis and in Their Daughters: A Potential Role for Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1.</a> Biol. Reprod. 80, (2009).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Ci sono diversi parametri critici che dovrebbero essere notato durante l&#39;esecuzione l&#39;induzione chirurgica di endometriosi nei topi. In primo luogo, l&#39;endometriosi è una malattia estrogeno-dipendenti e come tale questo tipo di chirurgia deve essere eseguita nell&#39;animale intatto o in alternativa negli animali ovariectomizzati integrato con estrogeni 20. In secondo luogo, la sutura biopsie endometriali alla cascata arteriosa deve essere eseguita con estrema cura. Abbiamo scoperto che usando solo...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reagente / apparecchiatura </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td> Matita di cera </td><td> Pescatore </td><td> NC9954135 </td></tr><tr><td> Vetrini </td><td> Pescatore </td><td> 12-550-433 </td></tr><tr><td> Contagocce </td><td> Pescatore </td><td> S79383 </td></tr><tr><td> Microscopio ottico standard per la valutazione strisci citologia vaginale </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Buprenorfina HCL c3 (CARJET) 10X1ml </td><td> Butler animali Alimentazione Salute </td><td> 022891 </td></tr><tr><td> Fosfato sterile salina tamponata (PBS) </td><td> Gibco </td><td> 14040-117 </td></tr><tr><td> 10.000 U / ml penicillina, 10.000 mg / ml di streptomicina in 0,85% NaCl </td><td> Hyclone </td><td> SV30010 </td></tr><tr><td> Isoflurano </td><td> AbbottAnimal Health </td><td> 05260-05 </td></tr><tr><td> Isoflurano non rirespirazione anestetico sistema </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ricircolo di acqua calda di riscaldamento pad </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 ml siringa guaina </td><td> Pescatore </td><td> 14-823-16G </td></tr><tr><td> Polvere di guanti sterili libero </td><td> Fisherbrand </td><td> 19020558 </td></tr><tr><td> Unguento oftalmico </td><td> Farmaceutica principali </td><td> 10033691 </td></tr><tr><td> Piccolo tagliaunghie elettrici </td><td> Wahl </td><td> 9861-600 </td></tr><tr><td> Clorexidina macchia </td><td> Pescatore </td><td> NC9863042 </td></tr><tr><td> 70% di etanolo </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Polylined campo sterile </td><td> Busse Ospedale Disposables </td><td> 696 </td></tr><tr><td> Taglia 3 bisturi </td><td> Pescatore </td><td> 22-079-657 </td></tr><tr><td> Numero 10 lame bisturi </td><td> Pescatore </td><td> 22-079-681 </td></tr><tr><td> Piccole forbici chirurgiche </td><td> Roboz </td><td> RS-5850 </td></tr><tr><td> Piccoli semi-curve seghettate forcipe </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td></tr><tr><td> 5-0 di seta nera intrecciata sutura </td><td> Ethicon </td><td> K870H </td></tr><tr><td> Sterilizzato vetro pirex Petri </td><td> Corning </td><td> 70160-101 </td></tr><tr><td> 2 millimetri biopsia </td><td> Miltex </td><td> 33-31 </td></tr><tr><td> Garza sterile </td><td> Kendall </td><td> 1806 </td></tr><tr><td> 6-0 nero ethilon sutura monofilo di nylon </td><td> Ethicon </td><td> 697G </td></tr><tr><td> Driver ago (opzionale) </td><td> Mondo Strumenti di precisione </td><td> 500023 </td></tr><tr><td> 5-0 undyed intrecciato rivestito vicryl sutura </td><td> Ethicon </td><td> J490G </td></tr><tr><td> 9 millimetri Autoclip ferita clip </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> Autoclip applicatore e di rimozione </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427630 </td></tr><tr><td> 23G ago </td><td> Becton Dickinson </td><td> 305193 </td></tr><tr><td> 1cc siringa </td><td> Becton Dickson </td><td> 301025 </td></tr><tr><td> 5X vetro stare ingrandimento (opzionale) </td><td> Pescatore </td><td> 14-648-23 </td></tr><tr><td> 10% di formalina tamponata </td><td> Pescatore </td><td> SF100-4 </td></tr><tr><td> Pinze </td><td> Roboz </td><td> RS-6466 </td></tr><tr><td> Elaborazione / embedding cassette </td><td> Pescatore </td><td> 15-197-700A </td></tr><tr><td> Biopsia cuscinetti in schiuma </td><td> Pescatore </td><td> 22-038-222 </td></tr><tr><td> RNAqueous RNA Kit di isolamento </td><td>Ambion </td><td> AM1912 </td></tr><tr><td> Azoto liquido </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Snap microcentrifuga coppola tubo orizzontale </td><td> Pescatore </td><td> 02-681-240 </td></tr><tr><td> Ketamina (opzionale) </td><td> Simga </td><td> K4138 </td></tr><tr><td> Domitor (medetomidina cloridrato) (opzionale) </td><td> Tocris </td><td> 2023 </td></tr><tr><td> Antisedan (atipamezolo) (opzionale) </td><td> Sigma </td><td> A9611 </td></tr></tbody></table>

modello murino di endometriosi chirurgicamente indotto da auto-trapianto di tessuto uterino

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

L&#39;endometriosi è una malattia cronica, dolorosa malattia la cui eziologia rimane sconosciuta. Inoltre, il trattamento di endometriosi può richiedere la rimozione laparoscopica delle lesioni, e / o croniche gestione farmaceutica del dolore e dei sintomi infertilità. Il costo associato con endometriosi è stato stimato a 22 miliardi di dollari all&#39;anno negli Stati Uniti 1. Per ulteriormente la nostra comprensione dei meccanismi alla base di questa malattia enigmatica, i modelli animali sono stati impiegati. Primati sviluppano spontaneamente endometriosi e quindi modelli di primati più simili alla malattia nelle donne. Modelli di roditori, tuttavia, sono più convenienti e facilmente reperibili 2. Il modello che abbiamo descritto qui comporta un trasferimento autologo di tessuto uterino al mesentere intestinale (Figura 1) ed è stato sviluppato nel ratto 3 e poi trasferito al mouse 4. L&#39;obiettivo del modello roditore autologo di endometriosi chirurgicamente indotta è quella di imitarela malattia nelle donne. Noi e altri hanno già dimostrato che l&#39;alterato pattern di espressione genica osservata nelle lesioni endometriosiche da topi o ratti rispecchia quella osservata nelle donne con la malattia 5,6. Uno dei vantaggi del realizzare l&#39;intervento nel topo è che l&#39;abbondanza di ceppi di topi transgenici disponibile può aiutare i ricercatori a determinare il ruolo di specifici componenti importanti nella creazione e la crescita di endometriosi. Un modello alternativo in cui vengono introdotti asportati frammenti umani endometriale al peritoneo di topi immunocompromessi è anche ampiamente utilizzato, ma è limitata dalla mancanza di un normale sistema immunitario che si ritiene essere importante per l&#39;endometriosi 2,7. È importante sottolineare che il modello murino di endometriosi indotta chirurgicamente è un modello versatile che è stato utilizzato per studiare come il sistema immunitario 8, 9,10 ormoni e fattori ambientali influenzano 11,12 endometriosi così come gli effetti dell&#39;endometriosi sulla Fertility 13 e il dolore 14.

Una descrizione della induzione chirurgica di endometriosi in topi e ratti con auto-trapianto di tessuto uterino alla cascata delle arterie del mesentere intestinale.

Modello murino di endometriosi chirurgicamente indotto da Auto-trapianto di tessuto uterino

L'endometriosi è una malattia cronica e dolorosa la cui eziologia rimane sconosciuta. Inoltre, il trattamento dell'endometriosi può richiedere l'asportazione laparoscopica di...

L'obiettivo generale di questa procedura è indurre chirurgicamente l'endometriosi nei topi mediante il trasferimento autologo di tessuto uterino nella cascata arteriosa del mesentere intestinale. Questo viene realizzato innanzitutto legando, rimuovendo ed esponendo l'endometrio dell'utero. Il secondo passaggio della procedura consiste nel creare tre impianti endometrioidi a partire dall'endometrio esposto, utilizzando una punta biopsica di due millimetri.Il terzo passaggio della procedura consiste nel suturare i tre impianti endometrioidi alle arterie nella cascata arteriosa del mesentere intestinale. L'ultimo passaggio della procedura è chiudere la parete addominale e la cute e permettere all'animale di recuperare le lesioni endometrioidi. I campioni prelevati dai topi assomigliano a quelli delle donne affette da endometriosi, come determinato dall'analisi istologica e dai profili di espressione genica e proteica.Generalmente, le persone nuove a questo metodo incontreranno difficoltà per tre motivi principali. Primo, i tessuti del topo sono molto piccoli. Secondo, il mesentere intestinale si danneggia facilmente e, terzo, i punti di sutura, se troppo stretti, provocheranno necrosi intestinale.Cominciare raccogliendo tutta l'attrezzatura chirurgica necessaria per un intervento chirurgico asettico di successo, inclusi le soluzioni per analgesia e anestesia. Dopo aver anestetizzato l'animale mediante isoflurano inalato, confermare l'anestesia completa verificando l'assenza di risposta a uno stimolo di pizzicotto sul dito del piede; per prevenire l'essiccazione durante l'intervento, applicare un unguento oftalmico sugli occhi, quindi rasare la zona chirurgica utilizzando piccole forbici elettriche. Disinfettare la zona chirurgica con tre passaggi alternati di soluzione di clorhexidina e alcol al 70%, quindi coprire l'animale con un campo sterile.Eseguire una piccola incisione mediana utilizzando piccole forbici o una lama di bisturi, terminando da 0,5 a 1,0 centimetri in senso rostrale rispetto all'apertura vaginale. Dissezionare delicatamente in modo ottuso la parete corporea dalla parete addominale per facilitare la chiusura del sito chirurgico. Dopo la dissezione ottusa, praticare una piccola incisione mediana nella parete addominale.Successivamente, utilizzando pinzette piccole, individuare delicatamente il corno uterino sinistro. L'utero si trova dorsalmente all'intestino, che è ciò che di solito è visibile all'ingresso del sito di incisione; sollevare delicatamente il corno uterino e far scivolare sotto di esso una pinza aperta, da utilizzare come retrattore. In questo momento è inoltre utile osservare l'aspetto delle ovaie e dell'utero.Per facilitare la determinazione del ciclo estrale. Fai scivolare due pezzi di filo di sutura in seta nera intrecciata numero 5 del diametro di sei-otto centimetri al di sotto della porzione allungata della corna uterina. Lega saldamente la corna all'innesto utero-tubarico.Avvicinarsi delicatamente alla tuba uterina e alla giunzione utero-cervicale. Utilizzando un nodo quadrato in ciascuna posizione, lasciare le estremità del filo di sutura non tagliate. Rimuovere la sezione del corno uterino compresa tra le due legature e collocare il tessuto in una capsula di Petri in vetro contenente circa 100 microlitri di PBS con penicillina e streptomicina.Tagliare le estremità del filo di seta per ultimo. Se il filo si allenta o si verifica sanguinamento, individuare il moncone e fare un altro nodo oppure no, utilizzando forbici piccole. Rimuovere il grasso dal corno uterino.Aprire l'utero inserendo una lama di un piccolo paio di forbici nel lume. Far scorrere delicatamente le forbici lungo l'utero mentre si tiene l'utero con una pinzetta. Nella capsula di Petri di vetro, utilizzare un punch per biopsia da due millimetri per asportare tre impianti di dimensioni uguali, avendo cura di non farli seccare.Posizionare una garza sterile immediatamente al di sopra della sede dell'incisione e inumidirla completamente con PBS sterile contenente penicillina e streptomicina. È fondamentale mantenere l'idratazione durante tutti i passaggi successivi utilizzando pinze piccole e lisce. Individuare delicatamente il ceco e spostarsi in senso orale lungo l'intestino tenue.Estrarre un piccolo tratto di quattro-cinque centimetri di intestino e disporlo a ventaglio sulla garza pre-umidificata in modo che la cascata arteriosa del mesentere intestinale sia chiaramente visibile. Assicurarsi di mantenere l'intestino costantemente umido con soluzione salina sterile. Posizionare un impianto su un ago, quindi utilizzare un filo di sutura nero aut six alon per fissare delicatamente l'impianto a un'arteria situata approssimativamente a 0,5 centimetri dall'intestino.Usarne solo uno. Lanciare la pinza e non stringere eccessivamente il punto di sutura. In caso contrario, si potrebbe interrompere il flusso sanguigno e causare la successiva necrosi dell'intestino.Completare due nodi con un solo getto, gettarne ciascuno e tagliare il filo di sutura entro due millimetri dall'impianto, quindi idratare l'intestino. Successivamente, procedere in direzione rostrale. Estrarre i successivi tre o quattro centimetri di intestino e riposizionare delicatamente il tratto che contiene già un impianto.Salta una o due arterie rispetto al sito di impianto precedente e sutura l'impianto successivo; ripeti per il terzo impianto. Infine, sutura la parete addominale e chiudi la cute con clip per ferite. Dopo la chiusura del sito chirurgico e la somministrazione di analgesici, posiziona l'animale in posizione prona nella gabbia, parzialmente sopra un tappetino riscaldante a circolazione d'acqua, fino al completo recupero dell'animale.Per recuperare le lesioni endometrioidi, individuare i punti neri nel mesentere intestinale. Misurare la lunghezza e la larghezza di ciascuna lesione endometrioide utilizzando un calibro. Dissezionare le lesioni endometrioidi, avendo cura di non perforarle.Rimuovere qualsiasi tessuto non endometrioide dalla lesione. Agitare leggermente le tre lesioni endometrioidi piene di liquido prima di rimuovere il punto di sutura. Rimuovere delicatamente il punto di sutura e incidere due delle lesioni endometrioidi.Pesare nuovamente questi campioni prima di procedere all'elaborazione del tessuto. Successivamente, escindere e pesare il resto del corno uterino. L'analisi istologica dell'endometriosi sia nelle donne che nel modello murino qui mostrato indica che la lesione endometrioide contiene ghiandole e stroma endometriali. Le lesioni endometriotiche nei topi contengono inoltre macrofagi carichi di emosiderina, che rappresentano un segno comune dell'endometriosi nelle donne. Le lesioni endometrioidi rimosse dai topi tre giorni dopo l'induzione appaiono infiammate e emorragiche, come mostrato a sinistra, dopo due o quattro settimane di crescita.Le lesioni endometriosiche nel modello murino sono simili a cisti piene di liquido e circondate da aderenze peritoneali rispetto al peso delle lesioni al momento dell'induzione. Le lesioni piene di liquido erano rispettivamente il 306% e l'862% più grandi, mentre le lesioni cistiche erano il 51% e il 172% più grandi a un mese e due mesi dall'induzione. Lesione endometrioide piena di liquido e a forma di lancia.I pesi rimangono costanti a un mese dal trattamento in cinque esperimenti diversi eseguiti seguendo questa procedura. Questo modello può essere utilizzato per rispondere a domande sulla patofisiologia dell'endometriosi e per esplorare nuove terapie per il trattamento del dolore e dell'infertilità associati a questa malattia.

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