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Utilisation de la séquence d'arrêt SecM comme un outil pour isoler les polypeptides Ribosome Bound
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JoVE Journal Biologia
Using SecM Arrest Sequence as a Tool to Isolate Ribosome Bound Polypeptides
DOI:

09:42 min

June 19, 2012

,

Capítulos

  • 00:05Título
  • 03:31DNA Template Preparation, In vitro Transcription and Translation
  • 05:34Isolation of Nascent Polypeptides and Analysis by Tris-tricine SDS PAGE
  • 07:17Representative RNC Results
  • 07:57Conclusion

Summary

Tadução automática

Nous décrivons ici une technique qui est maintenant couramment utilisé pour isoler de manière stable liés ribosome complexes de la chaîne naissante (RNC). Cette technique tire parti de la découverte que de 17 acides aminés de long "séquence d'arrêt" SecM peut arrêter élongation de la traduction dans un procaryote (<em> E. coli</em>) Du système, lorsqu'il est inséré dans (ou fusionné à l'extrémité C-terminale) de pratiquement toute la protéine.

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