Journal
/
Biologia
/
זיהוי של קומפלקסי חלבונים ב<em> חיידקי Escherichia</em> באמצעות טיהור זיקת פפטיד סדרתית בשילוב עם טנדם המוני ספקטרומטריית
JoVE Journal
Biologia
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Biologia
Identification of Protein Complexes in Escherichia coli using Sequential Peptide Affinity Purification in Combination with Tandem Mass Spectrometry
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

זיהוי של קומפלקסי חלבונים ב<em> חיידקי Escherichia</em> באמצעות טיהור זיקת פפטיד סדרתית בשילוב עם טנדם המוני ספקטרומטריית

DOI:
10.3791/4057-v

•

14:58 min

•

November 12, 2012

•

, , , ,
1Banting and Best Department of Medical Research, Donnelly Centre,University of Toronto, 2Deparment of Biochemistry, Research and Innovation Centre,University of Regina, 3Department of Medical Genetics and Microbiology,University of Toronto

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:47Construction of Gene-specific SPA-tagging in E. Coli DY330 Strain
  • 03:54Culturing and Sonication
  • 05:26Affinity Purification
  • 07:53Proteolysis and Sample Preparation for Mass Spectrometry
  • 09:38Protein Identification by LTQ Orbitap Velos Mass Spectrometer
  • 11:02Resultados
  • 14:27Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

טיהור זיקה של חלבונים מתויגים בשילוב עם ספקטרומטריית מסה (APMS) היא שיטה רבה עצמה למיפוי השיטתי של רשתות אינטראקצית חלבון ועל חקירת הבסיס המכאני של תהליכים ביולוגיים. כאן, אנו מתארים פפטיד הליך אופטימיזציה רציפת זיקה (SPA) APMS פתח לחיידק<em> חיידקי Escherichia</em> שיכול לשמש לבודד ולאפיין קומפלקסים יציבים רב חלבון להומוגניות קרובה אפילו החל מלהעתיק מספרים נמוכים לתא.

Tags

Protein ComplexesEscherichia ColiSequential Peptide Affinity PurificationTandem Mass SpectrometryProtein-protein InteractionsSubunit CompositionGene FunctionBiological SystemsAffinity PurificationMass SpectrometryChromosomally-tagged ProteinsCarboxy-terminal Sequential Peptide Affinity (SPA) Dual Tagging SystemGram-negative Escherichia ColiGenetically-tractable Host Laboratory StrainsGenome-wide InvestigationsProkaryotesTandem Affinity Purification MethodCalmodulin Binding Peptide (CBP)Tobacco Etch Virus

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/4057?article_type=v

זיהוי של קומפלקסים חלבונים עם proteomics כמותיים cerevisiae ס
check_url/pt/4057?article_type=v

הכתמה של חלבונים עם ג'ל Coomassie G-250 ללא חומצה אצטית ממס אורגני
check_url/pt/4057?article_type=v

טיהור של מ magneticum מסננים השגריר-1 Magnetosome חלבון Associated MamAΔ41
check_url/pt/4057?article_type=v

ניתוח מערכות חלבון גדול על ידי ספקטרומטריית מסה מבנית
check_url/pt/4057?article_type=v

כימות של חלבונים באמצעות העשרה Immunoaffinity פפטיד יחד עם ספקטרומטריית מסה
check_url/pt/4057?article_type=v

זיהוי שותפים חלבון אינטראקציה באמצעות טיהור טנדם זיקה
check_url/pt/4057?article_type=v

פרוטוקול לזיהוי של אינטראקציות בין חלבונים על הסמך<sup> 15</sup> תיוג N מטבולית, immunoprecipitation, כמותית המונית ספקטרומטריית וזיקת ​​אפנון
check_url/pt/4057?article_type=v

זיהוי אינטראקציה בין חלבונים ב<em> דרוזופילה</em> ראשי מבוגרים טנדם זיקה טיהור (TAP)
check_url/pt/4057?article_type=v

זיהוי לאחר translational השינויים של קומפלקסי חלבוני צמח
check_url/pt/4057?article_type=v

טיהור ללא chromatographic של פוליפפטידים דמויי אלסטין רקומביננטי וFusions עם פפטידים וחלבונים מן<em> חיידקי Escherichia</em

Read Article