Journal

Biologia

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van 15 N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

JoVE Journal
Biologia

This content is Free Access.

JoVE Journal Biologia

A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on ¹⁵N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van 15 N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

DOI:

10.3791/4083-v

•

14:44 min

•

September 24, 2012

•

Stefan Schmollinger², Daniela Strenkert², Vittoria Offeddu², André Nordhues², Frederik Sommer², Michael Schroda²

¹Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, ²University of Kaiserslautern

Capítulos

00:05Título
02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
05:22Immunoprecipitation
07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
14:07Conclusion

Summary

Tadução automática

Wij presenteren een variatie van de QUICK (kwantitatieve Immunoprecipitatie combinatie met Knockdown) benadering die eerder werd onderscheid te maken tussen echte en valse eiwit-eiwit interacties. Onze aanpak is gebaseerd op 15N Metabolische labeling, de modulatie van affiniteiten van eiwit-eiwit interacties door de aanwezigheid / afwezigheid van ATP, immunoprecipitatie en kwantitatieve massaspectrometrie.

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

MALDI Monstervoorbereiding: de Ultra Thin Layer methode

Een kwantitatieve beoordeling van de gist Lipidome met behulp van electrospray ionisatie massaspectrometrie

In-vivo detectie van eiwit-eiwit interacties op de Micro-oppervlakken met een patroon

Identificatie van eiwit complexen in Escherichia coli Met Sequential Peptide Affinity Purification in combinatie met tandem massaspectrometrie

Een nieuwe aanpak voor de Vergelijkende analyse van de multiprotein Complexen Gebaseerd op 15 N Metabole Labeling en kwantitatieve massaspectrometrie

Onderzoeken eiwit-eiwit interacties in levende cellen met behulp van bioluminescentie resonantie energieoverbrenging

Chromatine immunoprecipitatie assay voor de identificatie van Arabidopsis eiwit-DNA interacties In Vivo</em

Identificatie van MyoD Interactoomanalyse gebruik van Tandem Affinity Purification Gekoppeld aan massaspectrometrie

Studie van eiwit-eiwitinteractie in Autophagy onderzoek

Kwantificering van Site-specific eiwit Lysine Acetylation en Succinylation stoichiometrie met behulp van spectrometrie van de massa van het gegevens-onafhankelijke overname

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van<sup> 15</sup> N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

•

•

•