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El Protocolo para la identificación de las interacciones proteína-proteína base de<sup> 15</sup> N metabólico Etiquetado, inmunoprecipitación, cuantitativa Espectrometría de Masas y Modulación Affinity
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A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation
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El Protocolo para la identificación de las interacciones proteína-proteína base de<sup> 15</sup> N metabólico Etiquetado, inmunoprecipitación, cuantitativa Espectrometría de Masas y Modulación Affinity

DOI:
10.3791/4083-v

•

14:44 min

•

September 24, 2012

•

, , , , ,
1Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, 2University of Kaiserslautern

Capítulos

  • 00:05Título
  • 02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
  • 05:22Immunoprecipitation
  • 07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
  • 10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
  • 14:07Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Se presenta una variación de la RÁPIDA (inmunoprecipitación cuantitativa Combinado con Knockdown) enfoque que se introdujo anteriormente para distinguir entre verdadera y falsa interacciones proteína-proteína. Nuestro enfoque se basa en<sup> 15N</sup> Marcaje metabólico, la modulación de la afinidad de las interacciones proteína-proteína por la presencia / ausencia de ATP, la inmunoprecipitación, y espectrometría de masas cuantitativo.

Tags

Protein-protein Interactions15N Metabolic LabelingImmunoprecipitationQuantitative Mass SpectrometryAffinity ModulationCo-immunoprecipitationTargeted ApproachMass Spectrometry (LC-MS/MS)False Positive DiscoveriesRNAiQUICK (QUantitative Immunoprecipitation Combined With Knockdown)

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