É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 01:13Seeding of U2OS-based Cyclin B-SNAP Reporter Cells
- 03:38Staining of Reporter Cells with SNAP Substrate
- 05:34Measurement of Fluorescence Intensity
- 07:07Analysis of Proteolytic Profiles using Scan^R
- 09:15Results: Cyclin B Kinetics during Mitosis
- 10:31Conclusion
Metafase å anaphase overgang utløses gjennom anaphase-fremme kompleks (APC / C)-avhengig ubiquitinering og påfølgende ødeleggelse av cyclin B. Her har vi etablert et system som etter puls-chase merking, tillater overvåking cyclin B proteolyse i hele cellepopulasjoner og forenkler påvisning av forstyrrelse fra mitotiske sjekkpunkt.
Tags
ProteolysisCyclin BSingle Cell LevelWhole Cell PopulationsChromosome DistributionGenetic StabilitySpindle Assembly Checkpoint (SAC)Mitotic Surveillance MechanismAPC/C Subunit Cdc20SecurinMitotic ExitChromosome SeparationImproper Chromosomal AttachmentSAC SignalingAPC/CCdc20MicrotubulesSpindle DisruptionArtificial Effects
