É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
- 03:55On-column Oxidative Crosslinking
- 04:50TFA Elution and Quantitation
- 05:52CNBr Digestion
- 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
- 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
- 11:19Conclusion
Biofysiske og biokemiske studier af samspillet mellem membran-embedded proteindomæner står over for mange tekniske udfordringer, hvoraf den første er at opnå passende undersøgelse materiale. I denne artikel beskrives en protokol til fremstilling og oprensning af disulfid-stabiliserede transmembrane peptidkomplekser, der er egnede til strukturel analyse ved opløsning kernemagnetisk resonans (NMR) og andre analytiske anvendelser.
