É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 02:13Tandem Recombineering (TR) for Creating Multigene Expression Constructs
- 04:57Composite Multigene Baculovirus Generation, Amplification and Storage
- 05:02Baculovirus Generation
- 06:42Amplification
- 08:14Storage
- 08:55Protein Production and Downstream Processing
- 08:57Infecting Larger Cultures and Monitoring YFP
- 10:20Cell Lysis and Fractionation
- 10:45Protein Purification
- 11:07Future Outlook
- 11:33Results: Production of Eukaryotic Protein Complexes by MultiBac
- 12:18Conclusion
Protein-komplekser katalyserer vigtige cellulære funktioner. Detaljeret funktionel og strukturel karakterisering af mange essentielle komplekser kræver rekombinant produktion. MultiBac er et baculovirus / insektcelle-systemet særligt skræddersyet til at udtrykke eukaryote proteiner og deres komplekser. MultiBac blev gennemført som en åben adgang platform og standard operationelle procedurer er udviklet til at maksimere sin nytte.
