Introduzione alla microscopia a fluorescenza

La microscopia a fluorescenza è uno strumento analitico molto potente che combina le proprietà di ingrandimento della microscopia ottica con la visualizzazione della fluorescenza. La fluorescenza è un fenomeno che coinvolge l’assorbanza e l’emissione di una piccola gamma di lunghezze d’onda della luce da parte di una molecola fluorescente nota come fluoroforo. La microscopia a fluorescenza viene eseguita in combinazione con il microscopio ottico di base con l’aggiunta di una potente sorgente luminosa, filtri specializzati e un mezzo per etichettare fluorescentemente un campione. Questo video descrive i principi di base alla base della microscopia a fluorescenza, tra cui il meccanismo di fluorescenza, lo spostamento di Stoke e il fotosableaching. Fornisce anche esempi dei numerosi modi per etichettare fluorescentemente un campione, incluso l’uso di anticorpi e proteine marcati fluorescenti, coloranti fluorescenti di acidi nucleici e l’aggiunta di proteine naturalmente fluorescenti a un campione. I componenti principali del microscopio a fluorescenza, tra cui una sorgente di luce allo xeno o al mercurio, filtri luminosi, lo specchio dicroico e l’uso dell’otturatore per illuminare il campione sono tutti descritti. Infine, vengono mostrati esempi di alcune delle numerose applicazioni per la microscopia a fluorescenza.