Name: Sinir Devre Kaydı bir Bozulmamış Hamamböceği Sinir Sistemi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-04T20:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 51 s
Description: Keşfedin hamamböceği ventral sinir kordonu diseksiyonu ve ekstraselüler kayıt teknikleri ile duyusal sinir işleme mekanizmalarını. Bu yöntem sinirbilim ve davranışsal biyoloji araştırmalarında değerli bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz çizimler için Hyewon Cooper teşekkür ederim.

1.. Teşrih Bu protokol boyunca kullanılan Hamamböceği tuzlu su çözeltisi, aşağıdaki bileşime sahiptir: Hamamböceği tuzlu su çözeltisi 36: (100 ml gram) 210 mM NaCl (1,227 gr) 2.9 mM KCl (0.0216 g) 1.8 mM CaCl2 (0.0265 g) 0.2 mM NaH 2 PO 4 • 2H 2 O (0.0032 g) 1.8 mM Na 2 HPO 4 • 7H 2 O (0,0483 g) (PH 7.2. 1 M NaOH ve 1 M HCI ile pH ayarlayın.) <ol><li> Sağlam Cerci (Şekil 1) sahip olan tanktan erkek hamamböceği seçin. Erkek son segmentleri kadın oranla dar ve yumurtalıklar ve yumurta kütlesi hiçbir içeren, erkekler incelemek kolaydır. P. erkek americana cerci arasında kısa prob ucu bir çift var. Bu uçları kadınlarda gözlenen değildir. </li><li> Kanatlar, bacaklar ve baş kesti ve bir di vücut, ventral yüzü yukarı, pinsh silikon elastomer ile kaplı. </li><li> Forseps ventral plakaları almak ve posterior sonunda başlayan ve öne çalışma, ince makas ile kesilerek. Cerci kuru tutmaya çalışırken her zaman tuzlu su ile nemli iç organları tutmak. Bir Cerci ıslatmasını önlemek için tuzlu karın yukarı konumlandırmak için mum ya da kauçuk parçaları kullanabilirsiniz. Onlar ıslanmasına yoksa, doku kağıt parçası ile kurulayın. Tarafına iç organları ve beyaz madde (yağ vücut) itin. VNC alanın merkezinde, karın uzunluğu boyunca uzanan ve parlak trakea arasında görünür olmalıdır. Sinir kablosu saydam ve başlangıçta aydınlatma (Şekil 2) doğru ayarlanana kadar görmek zor olabilir. Forseps veya böcek pimleri ile VNC ele YAPMAYIN; yerine cam problar kullanılarak manipüle. </li><li> Hayvanın trakea sistemini en iyi olarak forseps ile sinir kordonu mümkün olduğunca ve ince cam muhtaç bir çift ile temizlemekles, çok dikkatli uzunlamasına A6 ve A5 veya A5 ve A4 ganglionlar (Şekil 3) arasında VNC connectives bölünmüş. Cradle cerci ve kısaltılmış böcek pimleri ve balmumu veya hazırlık (Şekil 4A ve B) uyması için kesilebilir silikon elastomer bir kama ile tuzlu su yukarıya doğru karin. Ganglion içine proje Cercal sinirleri zarar vermemek için son karın segmentinde ekstra dikkatli olun (Şekil 2B ve 5). </li></ol> 2. Ekstrasellüler Kaydı <ol><li> Disseke hazırlanması, mikroskop, ve kayıt cihazı (Şekil 6) nöronlardan gelen sinyaller geçersiz olabilir harici, özellikle AC, elektrik alanlarını engellemek için bir Faraday kafesi içinde kurulum olmalıdır. </li><li> Bu mikroskop sahne bakan böylece mikroskop yerleştirin. Hazırlık aşamasında yerleştirilir sonra, yüksek yoğunluklu aydınlatıcı kirişin konumunu ayarlamakbunu en iyi görünüm için. </li><li> Entegre veri kayıt ünitesi AC / DC diferansiyel amplifikatör bağlayın (özel donanım ve yazılım ayarlarına ayrıntıları önceden 25 tarif edilmiştir). Bir emme elektrodu tutan kafa sahne yükselticiye bağlı olmalıdır. Cl ile kaplanmış gümüş bir topraklama kablosu - daha istikrarlı kayıtları karın sonuçlara sokulur. Vücut boşluğunda çözelti, çanak banyo sıvısı ile temas, bir kayıt elektrotu kalır topraklı ilişkili akışkan içinde değilse nedenidir. </li><li> 4 kHz için kayıt frekansı ayarlayın. 500 mV (bu iz görselleştirme optimize etmek için ayarlanabilir) voltaj ölçek (y-ekseni) ayarlayın. Uyarılara yanıt olarak nöral aktiviteyi kaydetmek için sürekli veya osiloskop modunda kayıt yazılımı çalıştırın. </li><li> A5 yakın VNC connectives birini kesip bir emme elektrot içine A6 bağlı kesik ucunu yerleştirin. P emin olunsinir emme önce içindeki gümüş tel kapsayacak şekilde emme elektrodu içine ull tuz. </li><li> Her cercus üzerinde bulunan kıllar üzerinde bir kuru pipet darbe hava ile. Kaydedilen Bağ için cercus ipsilateral üzerindeki tüyleri uyarıcı taraf farklı bir tepki verir olmadığına bakın. Yanıtların genlik ve uyarılması sırasında belirli bir zaman aralığı içinde sivri sayısına dikkat edin. </li><li> Kayıt için bir Cercal sinir emme elektrodu hareket ettirin. Gerekirse küçük bir açıklığı olan bir elektrot ucu için daha iyi bir uyum, anahtarı almak için. </li><li> A6 Cercal sinir yakın kesilir ve sonra cercus giden sinir emmek. Aksiyon potansiyellerinin kendiliğinden ateşleme olmalıdır. Şimdi, cercus üzerine hava üflemek ve yanıtları not edin. </li></ol> 3. Elektrikle İşe belirleme Duyu sinirleri uyarıcı <ol><li> O (100-500 mse izlerini kaydeder böylece moduna süpürmek için kayıt yazılımı değiştirmec.) her bir uyarıcı tetiklenir. </li><li> Stimülatör çıkışına uyarıcı elektrot bağlayın. </li><li> Iki mini-kanca açar veya klips ile stimülatör kablosunu bağlayın. </li><li> Kayıt birimi üzerinde tetikleme girişine stimülatör BNC tetik çıkışını. </li><li> 10 msn; Frekans:;: Süre: Gecikme 0.3 sn aşağıdaki stimülasyon parametreleri bir tepki uyandırmak gerekir 1 Hz; Voltaj: kayıtlarında bir sinyal elde etmek gerektiği gibi (sadece eşiğin üzerinde ve maksimum yanıt elde edememek) ayarlayın. Bir yüksek gerilim sinire zararlı olabilir atanmada için maksimum eşikten daha yüksek gerilimlere gitmek için hiçbir sebep yoktur. </li><li> Uzun bir sinir kökü uyarıcı emme elektrot içine (Şekil 7, ok kafa) çekilebilecek böylece mümkün olduğunca uzak olarak Cercal sinir kesti. A6 ve A5 veya başka bir segment daha fazla ön arasındaki bağ kullanılabilir. </li><li> Kayıt emme elektrot ayarlayın böylece can puelektrot içine bir kesim bağ yukarı edeceğiz. Sinirlerdeki emme önce içindeki gümüş tel kapsayacak emme elektrotların içine biraz tuzlu çekmek için emin olun. Uyarıcı elektrot da (A3 yakın karın ideal) banyo tuzlu topraklanmış olduğundan emin olun. </li><li> Bir aksiyon potansiyeli ekranda görünene kadar artan gerilimin tek uyaranlara bir dizi sunun. Bir yanıt işe minimal uyarıcı gerilim ve süresi bir kayıt yapmak gerekir. Connectives bir sinaptik tepki görülmektedir kadar yoğunluğunu artırın. Dev akson gelen büyük başak (ekstraselüler AP) ilk görünür ve daha sonra diğer küçük AP da görülebilir. </li></ol>

<ol><li>Full, R. J., Tu, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanics+of+a+rapid+running+insect%3A+two-%2C+four-+and+six-legged+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanics of a rapid running insect: two-, four- and six-legged locomotion.</a> J. Exp. Biol. 156, 215-231 (1991).</li>
<li>Ritzmann, R. E., Tobias, M. L., Fourtner, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flight+activity+initiated+via+giant+interneurons+of+the+cockroach%3A+Evidence+for+bifunctional+trigger+interneurons%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Flight activity initiated via giant interneurons of the cockroach: Evidence for bifunctional trigger interneurons.</a> Science. 210, 443-445 (1980).</li>
<li>Libersat, F., Camhi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+cercal+position+during+flight+in+the+cockroach%3A+a+mechanism+for+regulating+sensory+feedback%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Control of cercal position during flight in the cockroach: a mechanism for regulating sensory feedback.</a> J. Exp. Biol. 136, 483-488 (1988).</li>
<li>Ganihar, D., Libersat, F., Wendler, G., Cambi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wind-evoked+evasive+responses+in+flying+cockroaches%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology.+A%2C+Sensory%2C+Neural%2C+and+Behavioral+Physiology%22%5BJournal%5D)">Wind-evoked evasive responses in flying cockroaches.</a> Journal of Comparative Physiology. A, Sensory, Neural, and Behavioral Physiology. 175, 49-65 (1994).</li>
<li>Pipa, R. aD., F, <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPipa%2C+RaD+%22The+American+Cockroach%22">The American Cockroach</a>. , Chapman and Hall. 175-216 (1981).</li>
<li>Westin, J., Langberg, J. J., Camhi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+of+giant+interneurons+of+the+cockroach%3B+Periplaneta+americana+to+wind+puffs+of+different+directions+and+velocities%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A%3A+Neuroethology%2C+Sensory%2C+Neural%2C+and+Behavioral+Physiology%22%5BJournal%5D)">Responses of giant interneurons of the cockroach; Periplaneta americana to wind puffs of different directions and velocities.</a> Journal of Comparative Physiology A: Neuroethology, Sensory, Neural, and Behavioral Physiology. 121, 307-324 (1977).</li>
<li>Camhi, J. M., Tom, W., Volman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+escape+behavior+of+the+cockroach+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A+Neuroethol.+Sens.+Neural+Physiol%22%5BJournal%5D)">The escape behavior of the cockroach Periplaneta americana.</a> J. Comp. Physiol. A Neuroethol. Sens. Neural Physiol. 128, 203-212 (1978).</li>
<li>Nicklaus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Die+Erregung+einzelner+Fadenhaare+von+Periplaneta+americana+in+Abh%C3%A4ngigkeit+von+der+Gr%C3%B6sse+und+Richtung+der+Auslenkung%5BTitle%5D)+AND+%22Z.+Vgl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Die Erregung einzelner Fadenhaare von Periplaneta americana in Abhängigkeit von der Grösse und Richtung der Auslenkung.</a> Z. Vgl. Physiol. 50, 331-362 (1965).</li>
<li>Westin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+to+wind+recorded+from+the+cercal+nerve+of+the+cockroach+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A+Neuroethol.+Sens.+Neural+Physiol%22%5BJournal%5D)">Responses to wind recorded from the cercal nerve of the cockroach Periplaneta americana.</a> J. Comp. Physiol. A Neuroethol. Sens. Neural Physiol. 133, 97-102 (1979).</li>
<li>Ritzmann, R. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRitzmann%2C+RE+%22Neural+Mechanisms+of+Startle+Behavior%22">Neural Mechanisms of Startle Behavior</a>. , Plenum Press. 93-131 (1984).</li>
<li>Ritzmann, R. E., Pollack, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+thoracic+interneurons+that+mediate+giant+interneuron-to-motor+pathways+in+the+cockroach%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A+Neuroethol.+Sens.+Neural+Physiol%22%5BJournal%5D)">Identification of thoracic interneurons that mediate giant interneuron-to-motor pathways in the cockroach.</a> J. Comp. Physiol. A Neuroethol. Sens. Neural Physiol. 159, 639-654 (1986).</li>
<li>Plummer, M. R., Camhi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+sensory+signals+from+noise+in+the+escape+system+of+the+cockroach+-+the+role+of+wind+acceleration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Discrimination of sensory signals from noise in the escape system of the cockroach - the role of wind acceleration.</a> J. Comp. Physiol. 142, 347-357 (1981).</li>
<li>Bullock, T. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBullock%2C+TH+%22Neural+Mechanisms+of+Startle+Behavior%22">Neural Mechanisms of Startle Behavior</a>. , Plenum Press. 1-14 (1984).</li>
<li>Pollack, A. J., Ritzmann, R. E., Watson, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+pathways+for+tactile+sensory+information+to+thoracic+interneurons+in+the+cockroach%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Dual pathways for tactile sensory information to thoracic interneurons in the cockroach.</a> J. Neurobiol. 26, 33-46 (1995).</li>
<li>Atwood, H. L., Wiersma, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Command+interneurons+in+the+crayfish+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Command interneurons in the crayfish central nervous system.</a> J. Exp. Biol. 46, 249-261 (1967).</li>
<li>Olson, G. C., Krasne, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+crayfish+lateral+giants+as+command+neurons+for+escape+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The crayfish lateral giants as command neurons for escape behavior.</a> Brain Res. 214, 89-100 (1981).</li>
<li>Comer, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyzing+cockroach+escape+behavior+with+lesions+of+individual+giant+interneurons%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Analyzing cockroach escape behavior with lesions of individual giant interneurons.</a> Brain Res. 335, 342-346 (1985).</li>
<li>Comer, C. M., Dowd, J. P., Stubblefield, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Escape+responses+following+elimination+of+the+giant+interneuron+pathway+in+the+cockroach%2C+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Escape responses following elimination of the giant interneuron pathway in the cockroach, Periplaneta americana.</a> Brain Res. 445, 370-375 (1988).</li>
<li>Keegan, A. P., Comer, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+wind-elicited+escape+response+of+cockroaches+%28Periplaneta+americana%29+is+influenced+by+lesions+rostral+to+the+escape+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The wind-elicited escape response of cockroaches (Periplaneta americana) is influenced by lesions rostral to the escape circuit.</a> Brain Res. 620, 310-316 (1993).</li>
<li>Casagrand, J. L., Ritzmann, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biogenic+amines+modulate+synaptic+transmission+between+identified+giant+interneurons+and+thoracic+interneurons+in+the+escape+system+of+the+cockroach%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Biogenic amines modulate synaptic transmission between identified giant interneurons and thoracic interneurons in the escape system of the cockroach.</a> J. Neurobiol. 23, 644-655 (1992).</li>
<li>Roeder, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organization+of+the+ascending+giant+fiber+system+in+the+cockroach%2C+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Zool%22%5BJournal%5D)">Organization of the ascending giant fiber system in the cockroach, Periplaneta americana.</a> J. Exp. Zool. 108, 243-261 (1948).</li>
<li>Ramos, R. L., Moiseff, A., Brumberg, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+and+versatility+of+extracellular+recordings+from+the+cockroach+for+neurophysiological+instruction+and+demonstration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Undergrad.+Neurosci.+Educ%22%5BJournal%5D)">Utility and versatility of extracellular recordings from the cockroach for neurophysiological instruction and demonstration.</a> J. Undergrad. Neurosci. Educ. 5, (2007).</li>
<li>Oakley, B., Schafer, R. Experimental neurobiology. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).</li>
<li>Welsh, J. H., Smith, R. I., Kammer, A. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWelsh%2C+JH+%22Laboratory+exercises+in+invertebrate+physiology%22">Laboratory exercises in invertebrate physiology</a>. , Burgess Publishing Company. Minneapolis. (1968).</li>
<li>Leksrisawat, B., Cooper, A. S., Gilberts, A. B., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+receptor+organs+in+the+crayfish+abdomen%3A+a+student+laboratory+exercise+in+proprioception%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Muscle receptor organs in the crayfish abdomen: a student laboratory exercise in proprioception.</a> J. Vis. Exp. (45), e2323(2010).</li>
<li>Bacon, J. P., Blagburn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ectopic+sensory+neurons+in+mutant+cockroaches+compete+with+normal+cells+for+central+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Ectopic sensory neurons in mutant cockroaches compete with normal cells for central targets.</a> Development. 115, 773-784 (1992).</li>
<li>Blagburn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Co-factors+and+co-repressors+of+Engrailed%3A+expression+in+the+central+nervous+system+and+cerci+of+the+cockroach%2C+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Co-factors and co-repressors of Engrailed: expression in the central nervous system and cerci of the cockroach, Periplaneta americana.</a> Cell Tiss. Res. 327, 177-187 (2007).</li>
<li>Blagburn, J. M., Gibbon, C. R., Bacon, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+engrailed+in+an+array+of+identified+sensory+neurons%3A+comparison+with+position%2C+axonal+arborization%2C+and+synaptic+connectivity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Expression of engrailed in an array of identified sensory neurons: comparison with position, axonal arborization, and synaptic connectivity.</a> J. Neurobiol. 28, 493-505 (1995).</li>
<li>Booth, D., Marie, B., Domenici, P., Blagburn, J. M., Bacon, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+control+of+behavior%3A+engrailed+knock-out+changes+cockroach+escape+trajectories%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Transcriptional control of behavior: engrailed knock-out changes cockroach escape trajectories.</a> J. Neurosci. 29, 7181-7190 (2009).</li>
<li>Schrader, S., Horseman, G., Cokl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directional+sensitivity+of+wind-sensitive+giant+interneurons+in+the+cave+cricket+Troglophilus+neglectus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Zool%22%5BJournal%5D)">Directional sensitivity of wind-sensitive giant interneurons in the cave cricket Troglophilus neglectus.</a> J. Exp. Zool. 292, 73-81 (2002).</li>
<li>Libersat, F., Goldstein, R. S., Camhi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsynaptic+regulation+of+sensory+activity+during+movement+in+cockroaches%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Nonsynaptic regulation of sensory activity during movement in cockroaches.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84, 8150-8154 (1987).</li>
<li>Stern, M., Ediger, V. L., Gibbon, C. R., Blagburn, J. M., Bacon, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+cercal+filiform+hair+sensory+neurons+in+the+first-instar+cockroach+restores+escape+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Regeneration of cercal filiform hair sensory neurons in the first-instar cockroach restores escape behavior.</a> J. Neurobiol. 33, 439-458 (1997).</li>
<li>Blagburn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+specificity+in+the+first+instar+cockroach%3A+patterns+of+monosynaptic+input+from+filiform+hair+afferents+to+giant+interneurons%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol+A%22%5BJournal%5D)">Synaptic specificity in the first instar cockroach: patterns of monosynaptic input from filiform hair afferents to giant interneurons.</a> J. Comp. Physiol A. 166, 133-142 (1989).</li>
<li>Watanabe, H., Ai, H., Yokohari, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatio-temporal+activity+patterns+of+odor-induced+synchronized+potentials+revealed+by+voltage-sensitive+dye+imaging+and+intracellular+recording+in+the+antennal+lobe+of+the+cockroach%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Sys.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spatio-temporal activity patterns of odor-induced synchronized potentials revealed by voltage-sensitive dye imaging and intracellular recording in the antennal lobe of the cockroach.</a> Front. Sys. Neurosci. (6), 55(2012).</li>
<li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+and+olfactory+input+segregation+in+the+mushroom+body+calyces+in+a+basal+neopteran%2C+the+American+cockroach%5BTitle%5D)+AND+%22Arthropod+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">Visual and olfactory input segregation in the mushroom body calyces in a basal neopteran, the American cockroach.</a> Arthropod Struct. Dev. 41, 3-16 (2012).</li>
<li>Elia, A. J., Gardner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+effects+of+DDT+on+the+behavior+and+central+nervous+system+activity+in+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic.+Biochem.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Long-term effects of DDT on the behavior and central nervous system activity in Periplaneta americana.</a> Pestic. Biochem. Physiol. 21, 326-335 (1984).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan ederim.

Bu klasik hazırlama teknikleri sergileyen için nedenlerinden biri cerci sistemi olmuştur olduğunu ve hala sinir devresi gelişme soruları ele yanı sıra sinaptik onarım ve yenilenme 26-31 ilişkin sorular içinde aktif bir araştırma alanıdır. Hamamböceği ventral sinir kablosu faaliyet çağrıştıran iki yöntem sinir sistemi fonksiyonu farmakolojik ajanların veya böcek öldürücü etkilerini incelemek için kullanılabilir. Bu deneyler, sadece tuz çözeltisi içine nöroaktif kimyasal çözülmesiyle yapılmaktadır. CNS işlev üzerindeki kimyasal etkisinin tutarlı bir okuma vermek üzere bağlaçlar bir motor sinir kayıt sırasında normal banyo ortamı bu çözelti alışverişi sonra, uyarılmış ya da spontan aktivitede bir değişiklik gözlenebilir. Tüm nörofizyolojik deneylerde gibi ortak bir sorun elektriksel gürültü. Bu hazırlıkları için sinyal kalitesi muhtemelen en büyük etken isinir dokusu ile ilgili emme elektrodu conta. Tamamen Cercal sinir veya bağ çekmek olmayan bir sıkı mühür idealdir. Kayıtlar ayrıca, sinir kord ve mineral yağı ve petrolatum karışımı ile VNC yalıtım altına yerleştirilmiş çift kanca elektrotlar ile yapılabilir. Karışım, bir şırınga içine yüklenir ve sinir kordonu 32 çevresinde deşarj edilebilir. Ayrıca dikkatli bir diseksiyon herhangi MSS hazırlanması gibi burada da önemlidir. Bazıları kolay dorsal manikür diseksiyon tarafından MSS erişmek için bulabilirsiniz. Bu ventral sinir kablosu zarar olasılığını azaltır iken bu yaklaşımı kullanarak iç organların tümünü kaldırmak için daha zor olabilir. Burada tarif değil, bu preparat, dev internöronlar 32,33 hücre içi kayıt elverişlidir. Tüm sinir kablosu da aynı anda birkaç kayıt ve uyarıcı elektrotlar karşılamak için kaldırılabilir. Antennal lob, mantar bo Aslında keşifdy, ve diğer ön CNS yapılar devam 34-35 hala. Hamamböceği CNS Modern nörobiyolojik araştırma ışık tutacak devam ederken bu özel hazırlık lisans akademik laboratuvarlarda kullanılabilecek kadar basittir.

Orada 4.000 &#39;den fazla hamam böceği türü vardır ama sadece yaklaşık 30 ev zararlıları vardır. Belki de en çok tanınan Afrika kökenli misnamed Amerikan hamamböceği Periplaneta americana ve şimdi neredeyse her yerde gezegen üzerinde bulunur. Tropik hızla koşma hızı 1 ve kaçamak davranış, ek olarak P. americana uçuş 2,3 yeteneğine sahiptir. Hamamböceği, merkezi sinir sistemi (MSS) baskın özellikleri kontrol etme segmentli doğası ve ademi, 4,5 işler vardır. Beyin, göğüs ve karın ganglion ventral sinir kablosu (VNC) oluşturmak için eşleştirilmiş interganglionic connectives ile birleştirilir. Her segmentte ganglion merkezleri entegre edilmiştir. Sadece altlarında, kan-beyin bariyeri geçirgenliğinin sorumlu hücreler ihtiva eden bir dış kortikal bölge ve nöronlar origi en somata oluşmaktadıro ganglion nating. Bu somata internöronlar, düzenleyici nöronlar, ya da motor nöronların ait olabilir. Onlar kökenli (yerel interneuron) ve ganglion içinde kalır aksonlarını veya MSS (interganglionic internöron) arasında ganglionlar veya periferik kas hücrelerinin (motor nöronlar) üzerine sona arasında proje aksonlar kaynağı. Çoğu somata ganglion korteks 5 ventral veya ventrolaterally konumlandırılmış. Eşleştirilmiş, interganglionic bağlaçlar sadece akson ve nöron hücre gövdeleri içerir. Bir ganglion nöropil glial hücreler (nöroglia), akson yolları, akson demetleri ve nöronların dendrit (nevrotiler) içerir. Nöropil nöronal hücre gövdeleri yoksundur. Bu sinir hücreleri ve girdilerin entegrasyonu arasında doğrudan sinaptik iletişim gerçekleşmez ganglion içinde bölgedir. Amerikan hamamböceği P. yeteneği (ayak, han algılamak ve aniden yaklaşan bir avcı yanıt americanad, vb.) cerci ve dev fiber sistemi 6,7 oluşan bir refleks devreye isnat edilmiştir. Cerci karın sonunda (Şekil 1) üzerinde bulunan boynuz gibi, rüzgar duyarlı yapıların bir çift vardır. P. americana her cercus ventral yüzeyi yaklaşık 200 ipliksi (iplik) 14 sütun halinde düzenlenmiştir kıllar içerir. Bu sütunların dokuz sürekli olarak ilişkili reseptör hücre ve akson yanıt özelliklerine göre farklı hayvanlarda tespit edilebilir. Her bir saç bu kolon spesifik olan bir düzlemde en kolay bükmek için izin veren bir yuva bulunmaktadır. Kendi düzlemi boyunca bir yönde hareket saç reseptör hücrede bir depolarizasyonu ve duyu nöron eylem potansiyelleri patlaması (AP) indükler. Ters yönde hareket eden bir kendiliğinden Ap 8 inhibe eder. Yanıtın sapma ve yönlere tercih edilen düzlemi her sütundaki farklıdır. Bu nedenle, filiform saç reseptör kompleksleri hava hareketini tespit etmek için değil, aynı zamanda AP, hava akımı kaynaklandığı yönde şeklinde, &#39;kodlama&#39; için de sorumludur. MSS tarafından bu bilgilerin işlenmesi bir &#39;uygun&#39; kaçış tepkisi 6,7 sonuçlanır. Duyusal kılların Bu fonksiyonel, sütunlu özgünlüğü hayvandan hayvana korunur. Her bir filiform saç reseptör hücre reseptör hücrenin akson 9 AP bir patlama ya da inhibisyonu ile sonuçlanan bir sinir olay (içine saç mekanik sapmasını transdüklenmesinden sorumludur. AP&#39;ler Cercal ile terminal karın ganglion (A6) seyahat onlar ventral sinir kablosu (VNC) dev akson ile sinaps sinir XI. dev aksonlar bir kaçış davranışının 6,10,11 sonuçlanan motor nöronların iletim ve sonraki uyarma sorumlu olduğuna inanılmaktadır. Davranışsal gecikme oP. kaçış tepkisi f americana herhangi bir hayvan 7 en kısa biridir. Davranış gecikme bir mekanoreseptörler bir uyaranın varış ve bir kaçış yanıt başlaması arasındaki zamanı. Saldıran bir kurbağa gelen teşebbüs kaçış kaydetmek için yüksek hızda sinematografi kullanıldığı deneylerde, hamamböceği hareketini 7,12 hamamböceği için dil uzatma başından itibaren yaklaşık 40 milisaniye (zaman uzak kurbağa onun dönüş başlayacak gözlendi. Kontrollü rüzgar puf kullanma , davranışsal gecikme 11 msn azaltılmış olabilir. Diğer deneyler iken bile daha düşük hızlar (3 mm / (msn 600 mm / 2 bir ivme ile) / msn 12 mm minimum rüzgar hızı puf, bir kaçış tepki uyandırmak olduğunu ortaya sn) yavaş yavaş 12 hareketli durdurmak için hamamböceği yürüyüş neden oldu. Tipik dev fiber sistemleri ve kaçış davranışı arasındaki mevcut güçlü bir korelasyon de 13,14 belgelenmiştir. Instözel bir hücre gerekli ve bir davranış uyandırmak için yeterli olan ances hücre komut nöron 15,16 olarak adlandırılır. P. rüzgar kaçış devresindeki dev internöron (CBS) americana refleks için gerekli değildir. Deneysel CBS ablasyon olan hayvanlar yine kaçış davranışı dolayısıyla bu yaktığımız komut nöronlar 17,18 kabul edilmez sergiler. Sensorimotor devresine rostral olan servikal bağlayıcıları kesilmesi, aynı zamanda beyinden giriş inen kaçış 19 yönünde üzerinde bir etkiye sahip olduğunu gösterir, davranışını etkiler. Ince kontrol ve yedekleme bu yönleri organizmanın hayatta kalması için büyük önem taşımaktadır ve biyojen aminler 20 üzeri nörokimyasal modülasyonu ile tamamlanmaktadır. P. americana sinir kablosu hazırlama Roeder &lt;öncü çalışmaları ile başlayan son on yıllardır neuroethologists için şık bir model sistem olmuştur&gt; 21 sup. Onların giriş 22,23,24 dev internöronlar birincil duyusal faaliyet ve çıkan yanıtları kaydetmek ekran ve analiz etmelerini sağlar. Tanımlanabilir nöral devreleri çevreye davranışsal yanıtların altında yatan fikrini iletmeye ek olarak, bu egzersizleri bu ortak ev haşere tarafından yapılan biyolojik katkılar için bir takdir aşılamak gerekir.

<table><tbody><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Reaktif&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Sylgard</td><td>Dow Corning</td><td>182 silicone kit</td><td>182 silikon elastomer kiti</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&lt;strong&gt;S7653&lt;/strong&gt;</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9333</td><td></td></tr><tr><td>CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670</td><td></td></tr><tr><td>NaH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;&amp;bull;2H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71505</td><td></td></tr><tr><td>Na&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;HPO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;&amp;bull;7H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9390</td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>221465</td><td>pH ayarı için</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1758</td><td>pH ayarı için</td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Malzeme Adı&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Diseksiyon aletleri</td><td>World Precision Instruments</td><td>assortment</td><td></td></tr><tr><td>İnsekt iğneleri</td><td>Fine Science Tools, Inc</td><td>26001-60</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>World Precision Instruments</td><td>PZMIII-BS</td><td></td></tr><tr><td>Cam elektrotlar</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>CLS7095B5X</td><td>200'lü kutu, vakum elektrotları</td></tr><tr><td>Mikromanipülatör</td><td>World Precision Instruments</td><td>MD4-M3-R</td><td>Tabana veya metal bir çubuğa sabitlenebilir</td></tr><tr><td>Gümüş tel (10/1.000 inç)</td><td>A-M Systems</td><td>782500</td><td></td></tr><tr><td>Bilgisayar</td><td>herhangi bir marka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AC/DC diferansiyel amplifikatör</td><td>A-M Systems</td><td>Model 3000</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 26T</td><td><a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> AD Instruments</a></td><td>27T</td><td></td></tr><tr><td>Kafa katı (Head stage)</td><td><a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> AD Instruments</a></td><td></td><td>AC/DC amplifikatör ile birlikte gelir</td></tr><tr><td>LabChart7</td><td><a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> AD Instruments</a></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elektrik iletkenleri</td><td>herhangi bir marka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cam aletler</td><td>kendi imalatınız</td><td></td><td>Sinirleri manipüle etmek için</td></tr><tr><td>Kablo ve konnektörler</td><td>herhangi bir marka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Puarlar ile pipetler</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-711-7</td><td>500'lü kutu</td></tr><tr><td>Beherler</td><td>herhangi bir marka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Balmumu veya modelleme kili</td><td>herhangi bir marka veya yerel mağazalar</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stimülatör</td><td>Grass Instruments</td><td>SD9 veya S88</td><td></td></tr><tr><td>Vakum elektrodu için plastik uç</td><td>yerel hırdavat mağazası (Watt's markası)</td><td>&amp;frac14; inç OD x 0.170 inç ID</td><td>Küçük parçalar halinde kesin. Alev üzerinde çekerek uzatın ve ucu uygun boyuta getirerek kesin.</td></tr></tbody></table>

sinir devre kaydı bir bozulmamış hamamböceği sinir sistemi

Neural Circuit Recording from an Intact Cockroach Nervous System

Hamamböceği ventral sinir kablosu hazırlık neuroethology deneylerde, sinir ağı modelleme, ve böcek fizyolojik etkilerini test etmek için uysal bir sistemdir. Bu makalede, bir böcek sinir sistemi çevre düzensizliklerin nasıl tepki tahlil etmek için kullanılabilir hamamböceği duyu modaliteleri kapsamını tarif eder. Burada vurgu Periplaneta americanadan dev fiber iletim cerci aracılık kaçış davranışı üzerinde. Bu yerinde hazırlanmasında nöronal aktivitenin tekrarlanabilir kayıtları oluşturmak için sadece orta diseksiyon beceri ve elektrofizyolojik uzmanlık gerektirir. Peptitler veya diğer kimyasal reaktif maddeler daha sonra fizyolojik tuzlu su ile çözelti içinde, sinir sistemine doğrudan uygulanabilir. Böcek de diseksiyon önce tatbik edilebilir ve kaçış devre merkezi sinir sisteminin heyecanlı devlet için bir vekil olarak hizmet verebilir. Bu bağlamda, bu tarifnamede anlatılan tahliller, aynı zamanda r yararlı olacaktıruzuv rejenerasyon ve sinir sistemi gelişimi evrimi ile ilgilenen esearchers hangi P. americana kurulmuş bir model organizmadır.

Bir hava puf ile cerci tüyleri uyarılması ya da abdominal gangliyon veya Cercal sinir kendisi (Şekil 8) arasında bağlaçlar bağlı hücre-dışı emme elektrodu kullanarak kaydedilebilir birincil duyu nöronlarının deşarj olur. Iki bölgeden kaydedilen Spike genlikleri milivoltluk birkaç mikro volt düzeyindedir. Çünkü ganglionunda sensor entegrasyon bileşiği, aksiyon potansiyeli veya Cercal sinir kaydedilmiş ayrı sivri uçlar halinde görülmektedir sivri uçların sayısı bağlaçlar gelen kayıtları gözlenen göre oldukça büyüktür. Bununla birlikte aynı zamanda nedeniyle, elektrot ve sinir doku arasındaki sıkı conta için bağ olarak kayıt esas olarak daha az gürültü olduğuna dikkat edin. Cerci geniş sivri de hava şişirme tarafından connectives (Şekil 8A) görülebilir. Bu teşvik edici bir yöntem kullanılarak, A3 ve A4 arasındaki tipik kayıtları<html> ly dev interneuron (ler) büyük bir başak özelliği göstermektedir. Fiziksel forseps ile Cerci sürtünme sırasında bir Cercal sinirden kayıt aktivitesinin güçlü bir büstünü (Şekil 8B 1) üretti. Başka bir kayıtta, hava 2 puflar her Cercal sinir hızlı bir kırmak yanıt (Şekil 8B, 2) üretilir. Elektrik A3 ve A4 arasındaki bağ bir emme elektrodu ve kayıt ile Cercal sinir uyarıcı zaman, bir (Şekil 8C 1) ile uyarılmış uyarılmasında bir eşik gözlemleyebiliriz. Cercal sinirin elektrik stimülasyonu açık bir sıcaklık gibi farmakolojik maddeler veya yerel çevresel çevreleyen ile manipülatif çalışmalar için tayin edilebilir connectives bir yanıt (Şekil 8C 2) ortaya çıkarır. <html> fig1.jpg &quot;/&gt; Bozulmamış cerci Şekil 1. Periplaneta americana. <img alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50584/50584fig2.jpg" /> Şekil 2. Kaldırıldı ventral manikür ile görülen hamamböceği sinir kordonu alttan görünüşü (A). Oklarla belirtilen segmentinin bir büyütülmüş görünüşüdür (B) &#39;de görülmektedir. (C) olarak, bağlayıcılar, cam sonda ile A4 ve A3 arasında dökülen edilmiştir. 6. karın ganglion iki Cercal sinirler kaudal sonunda bırakarak ile (D) gösterilir. <img alt="Şekil 3," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50584/50584fig3.jpg" /> Şekil 3.. Hamamböceği sinir kordonu şematik ventral görünümü. YS &quot;&gt; <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/50584/50584fig4.jpg" /> Şekil 4. Cerci tuzlu banyo dışına yukarı konumlandırılmış. Açıldı karın dışarı Cerci tutmak için silikon elastomer küçük bir kama şeklinde bir parça ile yükseltilmektedir roach kaudal ucu ile tuz (A) ile sular altında olabilir Banyonun (B). <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/50584/50584fig5.jpg" /> Şekil 5. (Oklarla belirtilen) Cercal sinir ile 6 inci karın ganglion. <img alt="Şekil 6," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50584/50584fig6.jpg" /> Şekil 6. Ekipman kurmak. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50584/50584fig6large.jpg" target="_blank">lar görüntülemek için buraya tıklayın</a>ger rakam. <img alt="Şekil 7" src="/files/ftp_upload/50584/50584fig7.jpg" /> Şekil 7. Uyarıcı ve kayıt elektrot kurmak. <img alt="Şekil 8," fo:content-width="5.75in" src="/files/ftp_upload/50584/50584fig8.jpg" /> Şekil 8.. Çeşitli uyarım işlemleri ile connectives ve Cercal sinir Sinir kayıtları. Cerci de hava şişirme ise A3 ve A4 arasındaki connectives bir emme elektrot ile Kaydı (A). Fiziksel (B 1) sürtünme veya Cercal sinir faaliyet hızlı patlamaları hava ponponları (B 2) sonuçlarını sağlayan ya da bir emme elektrot ile birincil Cercal nöronlardan kayıt. Elektrikle Cercal sinir uyarıcı (connectives yanıtları üretir <strong&gt; C = 1). Uyarıcı yoğunluğunda kademeli bir artış (oklar uyarıcı dışlayıcı genliğini gösterir) ve aşağıdaki uyarılmış tepkilerinin şiddetini dikkat edin. Cercal sinirin elektriksel stimülasyon tepkileri (C2) ölçülmesi için uyarılması tutarlılık için Cercal sinir uyarıcı, nispeten daha kontrollü bir araç sağlar.

Bu makalede, hamamböceği ventral sinir kablosu diseksiyonu ve Cercal sinir ve bağlaçlar hücre dışı kayıtları açıklar. Uyarılmış tepkiler Cercal sinir veya cerci doğrudan mekanik uyarma elektriksel stimülasyon tarafından oluşturulur.

Sinir Devre Kaydı bir Bozulmamış Hamamböceği Sinir Sistemi

The cockroach ventral nerve cord preparation is a tractable system for neuroethology experiments, neural network modeling, and testing the physiological ...

Bu teknik, bir organizmanın mekano, duyusal uyaranlar yoluyla çevresini nasıl algıladığını ve ventral sinir kordonunu ve daire sinirlerini açığa çıkararak bilginin CNS'nin daha yüksek merkezlerinde nasıl entegre edildiğini ve dönüştürüldüğünü gösterir. Birincisi, ventral sinir kordonundaki bağlardan kayıt yapar, bu da CNS'nin ilettiği sinyallerin türünü gösterir. Daha sonra, birincil nöronların aktivitesini bağlardaki aktivite ile karşılaştırmak için birincil duyusal nöronlardan kayıt yapılır.Sonuçlar, ince tüylerin hava titreşimi ile hareketinin elektrik sinyallerini CNS ile nasıl ilişkilendirdiğini ve bu sinyallerin nasıl işlendiğini göstermektedir. Bu yöntem, duyusal nöron aktivitesi ve hamamböceğinin entegrasyonu hakkında bilgi sağlayabilir veya diğer motor devrelere veya diğer model organizmalara uygulanabilir. Genel olarak, bu yönteme yeni olan kişiler mücadele edecektir, çünkü diseksiyon, birincil duyu sinirinden kayıt yaparken duyusal tüyleri kuru tutmak için hayvanı tam olarak doğru şekilde diseksiyon yapmak biraz zor olabilir.Bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritiktir, çünkü sinir demetine zarar vermek kolay olduğu için öğrenmesi zordur. Erkeğin son segmentleri dar olan ve dişiden farklı olarak yumurtalık ve yumurta kütlesi olmayan sağlam bir tutma tankından bir erkek hamamböceği seçin. P Americana erkeklerinde ayrıca dişilerde gözlenmeyen, kanatları, bacakları ve başı kesen sirk arasında bir çift kısa stil gözü vardır.Daha sonra vücudun ventral tarafını forsepsli silikon elastomer ile kaplı bir tabağa sabitleyin. Ventral plakaları alın ve arka uçtan başlayarak ve öne doğru çalışarak ince bir makasla kesin Circa'yı kuru tutmaya çalışırken iç organları her zaman sıkma makineleriyle nemli tutun. Bu, karnı kaldırmak için balmumu veya kauçuk kullanılarak yapılır.Cirque ıslanırsa, bir parça kağıt mendille kurulayın. Ardından, iç organları ve beyaz maddeyi bir kenara itin. VNC artık parlak trake arasında görünür olmalıdır E.It karın boyunca uzanır.VNC'yi görmek için aydınlatmanın ayarlanması gerekebilir. VNC'yi forseps veya böcek pimleri ile tutmayın. Bunun yerine, cam problar kullanarak manipüle edin.Hayvanın traket E sistemini bir çift ince cam iğne ile forseps ile sinir kordonundan mümkün olan en iyi şekilde temizleyin. VNC bağlantılarını çok dikkatli bir şekilde A, altı ve beş veya A beş ve dört gangliyon beşiği arasında uzunlamasına bölün. Siri ve karın tuzlu su banyosundan yukarı doğru çıkar.Kısaltılmış böcek pimleri ve balmumu veya silikon elastomerden bir kama kullanın. Gangliona çıkıntı yapan daire sinirlerine zarar vermemek için son karın segmentinde ekstra dikkatli olun. Diseke edilmiş hazırlık mikroskobu ve kayıt cihazı, nöronlardan gelen sinyalleri geçersiz kılabilecek dış elektrik alanlarını engellemek için bir Faraday kafesinin içine kurulmalıdır.Mikroskobu, sahneye bakacak şekilde konumlandırın. Ardından yüksek yoğunluklu aydınlatıcı huzmesinin konumunu ayarlayın. Hazırlığı en iyi şekilde görselleştirmek için AC CDC diferansiyel amplifikatörünü entegre veri kayıt ünitesine bağlayın.Bir mikro elektrot tutan kafa aşaması amplifikatöre bağlanmalıdır. Kayıtları stabilize etmek için. Karnı klorür ile kaplanmış gümüş tel ile topraklayın.Gümüş topraklama telinin nedeni, vücut boşluğu içindeki çözeltinin tabaktaki banyo sıvısı ile temasını kaybetmesidir. Daha sonra kayıt elektrodu ile ilişkili olan çözelti topraklanmış halde kalır. Ardından, kayıt frekansını dört kilohertz olarak ayarlayın.Ardından, iz üzerindeki voltaj ölçeğini 500 milivoltta başlatın. Bunu gerektiği gibi ayarlayın ve yazılımı, hazırlığa göre sürekli veya osiloskop modunda çalışacak şekilde ayarlayın. VNC konektörlerinden birini beşe yakın kesin.Ardından, altıya bağlı kesilmiş ucu, zil çözeltisi ile önceden doldurulmuş bir emme elektroduna yerleştirin. Kuru bir pipetle, her sirkte bulunan tüylerin üzerine hava üfleyin. Sirk üzerindeki kılların kaydedilen bağa ipsilateral olarak uyarılmasının, kontralateral olandan farklı bir yanıt verip vermediğini kontrol edin.Tepki genliğini ve ani yükselmelerin sıklığını not edin. Ardından emme elektrodunu kayıt için bir daire sinirine hareket ettirin. Uyum iyi değilse, daha küçük bir açıklığa sahip bir elektrot ucuna geçin.Daha sonra, daire sinirini altıya yakın kesin ve sirke giden siniri emdirin. Bu, spontan aksiyon potansiyelleri ile sonuçlanmalıdır. Şimdi sirke hava üfleyin ve tepkileri not edin.Kayıt yazılımını, bir uyaran her tetiklendiğinde izleri kaydetmesi için tarama moduna geçirin. Bu izler bir ile 500 milisaniye arasında olmalıdır. Uyarıcı elektrodu stimülatörün çıkışına bağlayın ve stimülatörün BNC tetik çıkışını kayıt ünitesindeki tetik girişine bağlayın.Şimdi, belirli stimülasyon parametreleri bir yanıt uyandırmalı, eşiğin hemen üzerinde bir sinyal elde etmek için uyarıcı voltajı ayarlamalı ve maksimum bir yanıt elde edebilmelidir. İşe alım için maksimum eşikten çok daha yüksek voltajlara gitmek için hiçbir neden yoktur. Yüksek voltaj sinire zarar verebileceğinden, daire sinirini mümkün olduğunca distal kesin, böylece uzun bir sinir kökü uyarıcı aspirasyon elektrot yoluna çekilebilir.Şimdi, A altı ve beş gangliyonlar arasındaki bağ veya daha ön segmentte kullanılabilir. Emme elektroduna salin çekin ve ardından elektrotun içine bir kesik bağ çekin. Uyarıcı elektrodun banyo tuzlu suyunda topraklandığından emin olun.İdeal olarak, kayıt elektrodu karın bölgesinde üçe yakın olmalıdır. Şimdi, ekranda bir bileşik aksiyon potansiyeli görünene kadar artan voltajda bir dizi tek uyaran iletin. Bir yanıt almak için minimum uyarıcı voltajı ve süreyi not edin.Düşük başlayın ve bağlarda sinaptik bir yanıt gözlenene kadar yoğunluğu artırın. Dev aksonlardan gelen büyük sivri uç ve hücre dışı aksiyon potansiyeli önce ortaya çıkacak ve daha sonra cci'de hava üflenerek diğer daha küçük aksiyon potansiyelleri de gözlemlenebilir. Bu uyarıcı paradigmayı kullanarak bağlantılarda büyük artışlar gözlendi.Üç ve dört arasındaki bağlantılardan elde edilen kayıtlar, tipik olarak, Siri'yi cımbızla fiziksel olarak ovuştururken bir daire sinirinden kayıt yapan dev inter nöronların büyük bir başak karakteristiğini gösterdi, başka bir kayıtta güçlü bir aktivite patlaması oluşturdu, iki hava üfleme, her biri daire sinirini bir emme elektrotu ile elektriksel olarak uyarırken ve üç ile arasındaki bağda kayıt yaparken daire sinirinde hızlı bir patlama tepkisi üretti. Dört, uyarılmış tepkilere stimülasyonda bir eşik kaydedildi. Çember sinirinin elektriksel stimülasyonu, farmakolojik ajanlarla veya lokal çevresel parametrelerle manipülatif çalışmalar için ölçülebilen bağlarda açıkça bir yanıt ortaya çıkarır Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa yaklaşık bir saat içinde yapılabilir. Bu işlemi denerken, sinirleri cımbızla sıkıştırmamayı veya aspirasyon elektrodu ile sinirleri çok sert çekmemeyi unutmamak önemlidir.Bu videoyu izledikten sonra, umarım hamamböceği sinir sistemini nasıl inceleyeceğinizi ve duyusal uyarılmış hücre dışı kayıtları nasıl toplayacağınızı iyi anlamışsınızdır.

neural-circuit-recording-from-an-intact-cockroach-nervous-system

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video standart tüm hücre teknolojisini kullanarak tek nöronlar kayıt için hazırlık yetişkin Drosophila tüm beyinleri izole etmek için prosedürü göstermektedir. Bu kayıt sırasında görüntülenen GFP etiketli hücreleri ve nöronlar görüntülerini içerir.

Yetişkin Drosophila Beyin Tüm Hücre Kayıtlar

Serbestçe hayvanlar davranıyor sinirsel aktivite desen non-invaziv ölçümler, yüksek hız videografisi ile nörofizyolojik kayıtları birleştirerek elde edilir.

Serbestçe Hayvanlar Behaving Sinir Devre Etkinleştirme kayıtları

Elektrofizyolojik Kayıt Drosophila Embriyo

Belirlenen Nöronlar ve Beslenme Davranışı Kalsiyum sinyaller aynı anda kayıt Drosophila melanogaster</em

Video, Drosophila larvalarının merkezi sinir sisteminden (CNS) nöronal aktivitenin hücre dışı kaydını göstermektedir. Kesilen CNS, bir kayıt odasına yerleştirilir ve temel ateşleme frekansını oluşturmak için inen bir sinirden gelen elektriksel aktivite kaydedilir. Daha sonra bir test ajanı eklenir ve ajanın uyarıcı veya inhibitör etkisini belirlemek için ateşleme frekansındaki değişiklik kaydedilir.

Drosophila Merkezi Sinir Sisteminde Elektriksel Aktivitenin Hücre Dışı Kaydı

Biz omurgasız koku yolunun ilk üç aşamada koku-uyarılmış yanıtlar karakterize etmek ekstraselüler çoklu ünite kayıt tekniği varyasyonları göstermektedir. Bu teknikler kolayca başka sinir sistemlerinin topluluk etkinliği incelemek için adapte edilebilir.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Olfaktör Devreler

Biz daha önce bize gergin hamamböceği bireysel birimlerin etkinliğini izlemek için izin verir hamamböceği beyinlerinin merkezi kompleksi içine tetrode telleri implante için bir teknik geliştirdi. Burada bize de özgürce böcekler hareket beyin aktivitesini kaydetmenize olanak sağlayan tekniğin değiştirilmiş bir sürümü mevcut.

Serbestçe Böcekler Yürüyüş Beyin Ektraselüler Tel Tetrode Kaydı

İki farklı beyin neuropiles veya iki farklı anatomik yolları eşzamanlı dışı uzun süreli kayıtları arıları kuruldu. Bu kayıtlar farklı beyin bölgelerinde tek nörona yanı sıra davranıyor hayvanda topluluk düzeyinde karşısında nöronal işleme zamansal açıdan soruşturma izin.

Davranan Bal arısı iki nöronal İşleme Dönemlerinde Eşzamanlı Uzun vadeli Kayıtlar

Keskin mikroelektrotlar, canlı Drosophila'da fotoreseptörün ve görsel internöron çıkışının doğru elektrofizyolojik karakterizasyonunu sağlar. Burada, tek tek hücrelerin kontrollü ışık stimülasyonuna yüksek kaliteli voltaj tepkilerini kaydetmek için bu yöntemin nasıl kullanılacağını gösteriyoruz. Bu yöntem, böcek bileşik gözlerinde nöral bilgi işlemeyi incelemek için idealdir.

Recording Hücre içi Gerilim Yanıtları için Elektrofizyolojik Yöntem<em&gt; Drosophila</em&gt; Işık Uyaranların için Fotoreseptörler ve internöronlar<em&gt; İn Vivo</em

Bu iletişim kuralı maliyet-etkin ve uygun farmakolojik ajanları, sinirsel proteinlerin genetik mutasyonlar test etkinleştirmek için Drosophila melanogaster merkezi sinir sistemi azalan elektriksel aktivitesinin kaydetmek için bir yöntem açıklar, ve/veya keşfedilmemiş fizyolojik yolları rolü.

Üçüncü-biçim Drosophila Melanogaster merkezi sinir sisteminin etkinliğinin elektrofizyolojik kayıt

Bu protokol, transgenik olmayan omurgasız türlerde, absorbans voltajı duyarlı boyalar ve bir fotodiyot dizisi kullanılarak nöronal popülasyon aktivitesini tek hücreli çözünürlükle görüntüleme için bir yöntem sunar. Bu yaklaşım, görüntüleme ve analizin tek bir gün boyunca takip edilebildiği hızlı bir iş akışı sağlar.

Transgenik Olmayan Omurgasızlarda Tek Nöron Çözünürlüğü ile Ağ Dinamiklerini Kaydetmek için Fotodiyot Tabanlı Optik Görüntüleme

Keşfedin hamamböceği ventral sinir kordonu diseksiyonu ve ekstraselüler kayıt teknikleri ile duyusal sinir işleme mekanizmalarını. Bu yöntem sinirbilim ve davranışsal biyoloji araştırmalarında değerli bilgiler sunar.

Sinir Devre Kaydı bir Bozulmamış Hamamböceği Sinir Sistemi

Daha fazla video keşfet