Large-scale Gene Knockdown in C. elegans Using dsRNA Feeding Libraries to Generate Robust Loss-of-function Phenotypes

Kathryn N. Maher; Mary Catanese; Daniel L. Chase

doi:10.3791/50693

/

Storskala Gene Knockdown i C. elegans Bruke dsrna Fôrings biblioteker for å generere en solid tap-av-funksjon Fenotyper

JoVE Journal
Biologia

É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.

JoVE Journal Biologia

Large-scale Gene Knockdown in C. elegans Using dsRNA Feeding Libraries to Generate Robust Loss-of-function Phenotypes

Storskala Gene Knockdown i C. elegans Bruke dsrna Fôrings biblioteker for å generere en solid tap-av-funksjon Fenotyper

DOI:

10.3791/50693-v

•

18:38 min

•

September 25, 2013

•

Kathryn N. Maher, Mary Catanese, Daniel L. Chase

¹Molecular and Cellular Biology Program,University of Massachusetts, Amherst, ²Neuroscience and Behavior Program,University of Massachusetts, Amherst, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of Massachusetts, Amherst

Capítulos

00:05Título
02:54How to Determine Plasmid Loss
04:32Making Temporary Copies of the Library Omniplates
06:35Preparation of Bacteria for Feeding Worms
09:28Determining the Concentration of L1 Arrested C. elegans Larvae
10:53dsRNA Feeding Screen
12:37Results: Effects of egl-30, dpy-17, pat-10, and unc-4 Knockdown
17:50Conclusion

Summary

Tadução automática

Mens dsrna fôring i C. elegans er et kraftig verktøy for å vurdere gen-funksjon, gjeldende protokoller for storskala fôrings skjermene resultere i variable knockdown effektivitet. Vi beskriver en forbedret protokoll for å utføre storskala RNAi fôring skjermer som resulterer i svært effektiv og reproduserbar knockdown av genuttrykk.

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Large-Scale Screens of Metagenomic Libraries

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

Large Scale Zebrafish-Based In vivo Small Molecule Screen

RNAi Screening for å identifisere Postembryonic fenotyper i C. elegans</em

Bruke SecM Arrest sekvens som et verktøy for å isolere ribosom Innbundne polypeptider

Bruke RNA-mediert interferens fôringsstrategi til skjerm for gener involvert i Body Size forordning i nematode C. elegans C. Elegans Ved hjelp av "Freeze-Cracking"

Metoder for å vurdere subcellulære avdelinger av muskel i C. elegans</em