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Um ensaio fenotípico microscópico para quantificação de micobactérias intracelulares adaptadas para triagem de alto rendimento/alto conteúdo
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JoVE Journal Imunologia e Infecção
A Microscopic Phenotypic Assay for the Quantification of Intracellular Mycobacteria Adapted for High-throughput/High-content Screening

Um ensaio fenotípico microscópico para quantificação de micobactérias intracelulares adaptadas para triagem de alto rendimento/alto conteúdo

DOI:
10.3791/51114-v

•

15:28 min

•

January 17, 2014

•

, , , , , , , ,
1Inserm U1019 – CNRS UMR 8024, Institut Pasteur de Lille,Université de Lille

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:44Preparation of the Bacterial Suspension
  • 03:07High-throughput Genome-wide siRNA Screening
  • 06:16High-throughput Compound Screening
  • 08:27Image Acquisition and Analysis
  • 11:10Results: Mtb Colonization in Host Cells is Inhibited by Silencing Dectin-1 and by Isonazid or Rifampicin Treatment
  • 14:37Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui, descrevemos um ensaio fenotípico aplicável às telas de alto rendimento/alto conteúdo de pequenas interfissões de RNA sintético (siRNA), composto químico e bibliotecas mutantes mycobacterium tuberculosis. Este método baseia-se na detecção de Mycobacterium tuberculosis rotulado fluorescentemente dentro de célula hospedeira fluorescente rotulada usando microscopia confocal automatizada.

Tags

TuberculosisMycobacteriaIntracellularPhenotypic AssayHigh-throughput ScreeningHigh-content ScreeningMycobacterium TuberculosisDrug ResistanceGenetic ScreensChemical ScreensFluorescence MicroscopyImage AnalysisHost-pathogen Interaction

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