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Farmaco-indotta Sensibilizzazione della ciclasi: L'ottimizzazione del dosaggio e miniaturizzazione per piccole molecole di siRNA e applicazioni di screening
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Bioengenharia
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JoVE Journal Bioengenharia
Drug-induced Sensitization of Adenylyl Cyclase: Assay Streamlining and Miniaturization for Small Molecule and siRNA Screening Applications
DOI:

09:39 min

January 27, 2014

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Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:37Expansion and Cryopreservation of Assay Ready Cells
  • 02:58Plating Assay Ready Cells
  • 04:15Small Molecule Screening and Persistent Agonist Treatment
  • 05:16Stimulation, Quenching, and Estimation of cAMP Accumulation
  • 07:02Results: Development and Testing of a Cell-based 384 Well Sensitization Assay with Receptor Antagonists
  • 09:12Conclusion

Summary

Tadução automática

L'attivazione persistente del inibitori G recettori accoppiati alla proteina provoca sensibilizzazione della segnalazione ciclasi ciclasi. Per identificare le vie molecolari essenziali, sono necessari approcci nonbiased, tuttavia, questa strategia richiede lo sviluppo di una base cellulare scalabile saggio cAMP sensibilizzazione. Qui, descriviamo un test di sensibilizzazione per la piccola molecola e lo screening siRNA.

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