Diagnóstico Ecografia de função de mouse Diafragma

O objetivo geral deste procedimento é demonstrar como avaliar com precisão a contratilidade do diafragma em um modelo de camundongo. Usando imagens de ultrassom, os primeiros passos são anestesiar o camundongo e remover seus pelos abdominais. Os próximos passos são aplicar o gel de ultrassom e resolver a imagem do diafragma usando as sondas de ultrassom.

Em última análise, os resultados podem mostrar a excursão do diafragma e a frequência respiratória através da utilização dos paquímetro eletrônicos do software. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes, como a miografia invasiva, é que ela não é invasiva e reduz o número de animais sacrificados. As implicações dessa técnica se estendem ao diagnóstico e potencial terapia da disfunção muscular respiratória.

Embora esse método possa fornecer informações sobre a contratilidade do diafragma em um modelo de camundongo, ele também pode ser aplicado a outros sistemas, como modelos clínicos, para avaliar a progressão da doença e a eficácia da terapia. Monte uma mesa de procedimento limpa com uma almofada isotérmica aquecida enrolada em uma toalha cirúrgica. A almofada aquecida deve ser usada para estabilizar a temperatura central do animal e, ao mesmo tempo, reduzir o estresse potencial para o animal.

O camundongo deve ser colocado na câmara de indução de anestesia com uma taxa de fluxo de oxigênio ajustada para 1,5 litros por minuto e com 3,5% de flúor vaporizado A sedação geralmente endurece em dois minutos e é notada pela perda da função motora voluntária. Em seguida, mantenha o estado anestesiado pela entrega de gás do cone nasal. Após anestesiar o animal, aplique uma pequena quantidade de pomada oftálmica diretamente nas córneas para reduzir o ressecamento dos olhos durante a anestesia.

O mouse nunca deve mostrar o reflexo de retirada do pedal. As membranas mucosas devem sempre ter uma cor rosa e o animal deve respirar de forma constante. Contenha cada perna do camundongo anestesiado na mesa de procedimento aquecida com um adesivo removível, como fita cirúrgica.

Usando um barbeador elétrico, remova a maior parte dos pelos na superfície ventral do corpo entre o abdômen e a metade da cavidade torácica. Em seguida, aplique o creme depilatório para remover os pelos restantes. Após dois a três minutos, limpe o creme com uma gaze úmida

Além disso, remova o excesso de pelos com água e gaze. Em seguida, limpe a região raspada com quatro esfoliantes de álcool 70% ou um anti-séptico equivalente no aparelho de ultrassom. Um transdutor micro convexo ou linear phased array é ideal devido a essas sondas, tamanho reduzido e excelente resolução axial.

Ajuste a frequência do ultrassom para uma faixa de 6,5 a 12 megahertz. Agora defina o modo da máquina, brilho e modos de movimento juntos, forneça a melhor imagem da contração do diafragma. Em seguida, aplique uma pequena quantidade de gel de ultrassom na parte superior do abdômen e massageie o gel em direção à cavidade torácica.

Coloque o transdutor de ultrassom no gel e incline-o para cima em direção ao coração. Ajuste a sonda para otimizar a resolução da imagem. Isso é desafiador, mas se tornará mais fácil com a prática.

É muito importante lembrar de monitorar a respiração do animal sob anestesia, apenas para garantir que os resultados do exame não sejam comprometidos. Pressione o botão de congelamento para salvar temporariamente as imagens do diafragma e view as contrações selecionadas. Salve a gravação como um loop cil, que permite medições posteriores da excursão diafragmática e da frequência respiratória.

Após a imagem, o camundongo deve se recuperar completamente da anestesia em 30 minutos. Não deixe o animal sozinho até que ele tenha recuperado a consciência suficiente para manter o esterno reclinado. Para analisar os dados no modo M, meça a profundidade e a taxa de movimento do diafragma do relaxamento à contração usando os paquímetros eletrônicos que fazem parte do software de ultrassom.

Alternativamente, no modo B, converta o loop CINA file em um MP quatro file e determine a taxa de respiração contando o número de contrações diafragmáticas durante o período de gravação, os paquímetros eletrônicos também podem ser usados no modo B para determinar a profundidade do movimento do diafragma. O diafragma de um camundongo, o deslocamento vertical máximo foi registrado e a distância foi então calculada conforme descrito pelo protocolo usando paquímetros eletrônicos. Tais medições foram feitas em três camundongos diferentes.

Para ilustrar, é depois de converter o arquivo de loop CIL em um arquivo MP quatro. A taxa de respiração foi determinada pela contagem do número de contrações diafragmáticas durante um período de registro de seis segundos. Essa análise foi realizada usando o modo B.

Alternativamente, o modo M forneceu uma imagem visualizada do movimento vertical do diafragma, bem como da taxa de respiração. Existem alguns artefatos de imagem potenciais que podem ocorrer ao realizar imagens de ultrassom diagnósticas, como reverberação. Outro artefato que pode ser encontrado é a presença de contos de cometas Uma vez dominada, essa técnica pode levar de 20 a 30 minutos se executada corretamente.

Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como avaliar com precisão a contratilidade do diafragma no modelo de camundongo usando uma técnica de imagem de ultrassom diagnóstica.