제브라피시 미세 주입 기술

제브라피시(Daniorerio)와함께 작업하는 데 있어 주요 장점 중 하나는 초기 단계 배아의 미세 주입에 의해 유전학을 쉽게 조작할 수 있다는 것입니다. 이 기술을 사용하여, 유전 물질 또는 녹다운 구조를 포함하는 해결책은 blastomeres로 전달됩니다: 새로 수정된 계란의 노른자 꼭대기에 앉아 있는 배아 세포. 세포질로의 전달은 blastomere로 직접 주입을 통해 달성되거나 용액이 노른자로 주입 된 후 발생하는 자연적인 세포질 운동을 통해 달성됩니다. 성공적인 유전 조작은 일반적으로 발달의 유전 기계장치를 해명하기 위하여 배아 표현형의 정량화에 선행됩니다.

이 비디오는 제브라피시 배아에서 미세 주입을 수행하는 소개를 제공합니다. 토론은 공기의 압력 펄스로 유체 운동을 통제하는 주입 장치 및 마이크로 인젝터를 포함하여 기술에 대한 필수 도구의 검토로 시작됩니다. 다음으로, 미세 주입 장치의 주입 및 교정 중에 배아를 안정화시키기 위해 천판의 붓기와 같은 중요한 준비 단계가 입증된다. 주사 절차는 주사를 수행해야 하는 시기와 장소에 대한 팁과 함께 제공됩니다. 마지막으로, 암RNA 주입을 통한 유전자 과발현, 안티센스 모르폴리노 올리고뉴클레오티드의 전달에 의한 유전자 침묵, 특별히 설계된 플라스미드 DNA를 이용한 형질전환 제브라피시 생성 을 포함하는 미세 주입 기술의 적용이 논의된다.