O zebrafish (Danio rerio) é um importante organismo modelo que é particularmente valioso para pesquisas em biologia do desenvolvimento. Os zebrafish são extremamente férteis e podem produzir centenas de descendentes por semana, por isso é relativamente fácil coletar um grande número de embriões para altos números amostrais. Além disso, os zebrafish passam por rápido desenvolvimento e os embriões são transparentes, permitindo uma fácil visualização dos processos de desenvolvimento.
Este vídeo abrange os passos necessários para a coleta de embriões de zebrafish recém-fertilizados. Uma breve visão geral do comportamento de acasalamento de zebrafish é apresentada, seguida de instruções para a instalação de cruzes em tanques especializados de reprodução de laboratório que permitem o acasalamento controlado. Também estão cobertas as condições necessárias para iniciar a liberação de ovos (conhecidos como desova) na manhã seguinte ao conjunto dos tanques. Em seguida, são apresentadas técnicas essenciais para o trabalho com embriões, incluindo a inibição do desenvolvimento de pigmentos com a PTU química, e a descorionação: um procedimento no qual a membrana semelhante à concha em torno do embrião (o acorde) é removida. Finalmente, o vídeo termina com algumas aplicações práticas dessas técnicas em pesquisa de desenvolvimento.
Procedimento
Zebrafish são um pequeno, mas poderoso sistema de modelos. Esses peixes prolíficos podem gerar centenas de descendentes por semana e muitos milhares ao longo de suas vidas. Desenvolvimento externo rápido e corpos transparentes tornam os embriões ideais para diversas aplicações. Este vídeo abordará o básico da coleta e manuseio de embriões antes de descrever os métodos atuais de pesquisa que se aproveitam dos embriões de zebrafish. Para gerar embriões, ajuda a saber um pouco s…