小鼠异位心脏移植技术

该程序的总体目标是执行和评估小鼠异位心脏移植的健康状况。这是通过首先小心地收获供体的心脏来实现的。在第二步中，在受体内通过手术制作移植部位，以留出足够的空间来植入供体组织。

接下来，通过形成动脉和静脉吻合口移植供体心脏。在最后一步中，在闭合受体之前验证血管缝合线的止血。最终，可以通过每日触诊监测移植物的健康状况，以评估各种因素对供体移植物存活的影响。

这种方法的视觉演示至关重要，因为吻合口步骤很难学习。缝合线的张力必须恰到好处，以避免渗漏和血流收缩。要收获供体心脏，首先用四向约束装置固定麻醉的供体动物。

剪掉皮毛后，用酒精擦拭皮肤。解剖皮肤后，在横膈膜下方做一个横向切口。要打开腹腔，请在肋插入点后方切开隔膜。

延长一整层，切开胸冰左右两侧的后侧胸腔，隔离下腔静脉或 IVC，然后在靠近其插入点的 IVC 周围放置一根松散的五根丝缝合线。在右心房中，注射 1 cc 的 4 摄氏度。肝素化的 SA 盐水进入 IVC，并用 5 T 丝缝合线连接血管并分开。

然后，在以类似的方式结扎和缝合右上静脉 CVA 后，轻轻地将心脏向动物的右侧滚动，并隔离并结扎暴露左肺动脉的左上静脉 CVA。现在用湿纱布和钝器固定心脏，从主肺动脉、左右肺动脉分支和升主动脉弓钝处解剖胸腺。解剖主动脉弓，去除周围组织，然后用微型剪刀将主动脉劈开右肱头动脉近端，直到心脏与主动脉分裂点之间没有分支。

主动脉弓的这一部分形成植入过程的动脉袖带。接下来，向下反射主动脉袖带，露出肺动脉干和肺动脉的左右分支。然后钝化，尽可能远离心脏地解剖远离周围组织的左右肺动脉分支。

肺动脉干尽可能远端分开，就在其分叉的近端，形成用于植入过程的静脉袖带。然后在心脏底部系上五根丝线。在底部将其切开，并将切除的组织转移到 4 摄氏度的盐水中。

植入供体心脏的总收获时间约为 10 至 15 分钟。麻醉和固定受体动物后，用聚维酮碘擦拭皮肤，并在两者之间用酒精或无菌水冲洗。重复此作 3 次，然后以无菌方式覆盖手术部位。

然后通过做一个 2 厘米的中线垂直腹部切口开始手术。要进入腹腔，将肠道向上缩回，并将组织外化到胸部，将其包裹在用无菌盐水湿润的无菌纱布中。接下来，将腹主动脉和下腔静脉隔离在肾血管下方，并在组织上部周围放置四根棉带，然后在吻合部位下方放置。

识别区域内的任何腰部血管并用 10 T 尼龙结扎它们。缝合，然后不是下部棉扎带，然后是上部缝合，以在主动脉中保留一些血液，使 A 自切术更容易进行。固定结后，用 30 号针头进入主动脉管腔。

然后使用细微剪刀沿血管纵轴沿直线将切口延长至约 2 毫米的长度。现在放置一根 10 aut 的尼龙缝合线。在供体主动脉中保持缝合，并缝合到受体主动脉切口的下角，以使供体主动脉与受体主动脉进行端到端的吻合。

系好缝合线后，将第二条 10 T 尼龙放在供体主动脉和切口和腹主动脉的上角与第一条尼龙相对，并系好这条缝合线。当第二次缝合就位时，在主动脉外侧壁上从上部到下部制作一条连续的缝合线，注意将内膜合拢并将其系在先前放置的留缝线上。接下来，以连续的方式缝合内侧并系好，将第一针和最后一针放在每一侧，尽可能靠近停留缝线。

目标是在这两者之间有三针均匀分布的针迹，总共五针。然后，要将供体肺动脉与受体 IVC 进行端到端吻合，首先用 30 号针刺穿 IVC，然后使用细微剪刀沿血管纵轴沿直线将切口延长约两毫米。接下来，用 10 结尼龙将供体肺动脉系在 IVC 切口的下角。

将第二个 10 oh 尼龙与第一个放在供体动脉和腹部 IVC 切口的上角并打结。然后在肺动脉和 IVC 之间制作一条连续的缝合线并系好，将第一针和最后一针放在每一侧，尽可能靠近停留缝线。目标是在这两者之间有五针均匀分布的针迹，总共七针。

现在松开远端四条 OTT 棉扎带，重建静脉血流。一旦观察到静脉吻合口的止血，逐渐松开近端的四条 OTT 棉带，观察动脉吻合术的止血情况。当两个吻合口都被认为安全时，从小鼠身上取下棉扎带，将肠道返回腹部，并使用五根丝将腹壁分成两层封闭。

以跑步的方式，将 1 毫升无菌、温热的生理盐水推注到腹部作为闭合时的液体复苏，并皮下注射 0.8 毫升生理盐水。最后，为了通过每日经腹触诊评估移植物功能，与腹膜内注射一样抑制小鼠。然后用食指尖轻轻按压腹壁，以确定移植物的跳动强度和规律性。

给触诊质量打分，从正常振幅和频率的 4 分到非跳动排斥移植物的 0 分。这种手术技术既有助于简单的移植物存活研究，也有助于复杂的实验方案。例如，在这个代表性实验中，研究了快速和/或穿孔素作为 CD 4 阳性 T 细胞介导的心脏排斥反应机制的参与。

结果表明，CD 4 阳性效应 T 细胞对心脏同种异体移植物的直接排斥需要移植物快速表达和 T 细胞 perran 表达的替代贡献，首次表明 CD 4 阳性 T 细胞的溶细胞活性可以在体内原发性急性同种异体移植物排斥反应中发挥专性作用。看完这个视频后，您应该对如何将缝合线放入吻合处以获得健康跳动的心脏移植物有很好的了解。