Die Elektroporation ist ein Verfahren, das in der biomedizinischen Forschung verwendet wird und das die Veränderung der Genexpression durch die Lieferung von fremdem, genetischem Material in Zellen ermöglicht. Um genauer zu sein, wird die in ovo Elektroporation bei Küken (Gallus gallus domesticus) im Frühstadium, die noch in ihrer Eierschale sind, angewendet. In diesem Verfahren werden DNA, oder „knockdown“ Konstrukte zuerst in das Zielgewebe injiziert. Das genetische Material kann die Plasmamembran jedoch nicht durchdringen, um eine Funktion in der Zelle auszuführen. Um dieses Problem zu lösen, wir ein elektrisches Feld angewendet, welches zu der temporären Unterbrechung der Membranstabilität führt. Das elektrische Feld führt auch dazu, dass sich die negativ geladenen Nukleinsäuren hin zu der positiv geladenen Elektrode durch die Löcher in der Plasmamembran bewegen, wodurch die DNA oder die „knockdown“ Konstrukte effektiv in die Zelle geleitet werden. Der Hauptvorteil dieses Verfahrens ist, dass die Lieferung des genetischen Materials zu einem bestimmten Zelltyp lokalisiert und zu einem bestimmten Entwicklungszeitpunkt erfolgen kann. Als Ergebnis können die genetischen Mechanismen, die individuelle Entwicklungsereignisse kontrollieren, untersucht werden.
Dieses Video gibt einen Überblick über die Grundlagen, die hinter der in ovo Elektroporation stehen, und führt die Werkzeuge ein, die für dieses Verfahren gebraucht werden, einschließlich von Kapillarnadeln, Elektroden, und einem Elektroporator. Außerdem wird eine Schritt für Schritt Anleitung wie man das Verfahren ausführt gegeben, bevor wir einige faszinierende Beispiele wie dieses Verfahren für genetische Veränderungen von Hühnerembryos benutzt werden kann, geben.
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