Eine Stärke des Kükens (Gallus gallus domesticus) als Modellorganismus für die Entwicklungsbiologie ist, dass sich der Embryo außerhalb des Weibchens entwickelt und daher leicht für die genetische Veränderung zugänglich ist. Viele Verfahren ermöglichen es den Forschen die Hühnerembryos in der Eierschale (in ovo) zu untersuchen, aber der Zugriff auf den Embryo ist beschränkt für Embryonen in späteren Entwicklungsstadien. Glücklicherweise können Küken ex ovo, also außerhalb der Eierschale, kultiviert werden. Der Hauptvorteil der ex ovo Kultur ist der größere Zugriff zu Geweben, die anderweitig durch die Schale oder die Ausrichtung des Kükens in der Schale, speziell für Embryos in späteren Entwicklungsstadien, blockiert wären.
Es gibt zwei grundlegende Strategien für die ex ovo Kultur: die Gesamtdotterkultur und die Explantatkultur. Für die Gesamtdotterkultur bricht man die Eierschale auf und transferiert den Inhalt in ein Behausungsmodul. In Explantatkulturen wird der Embryo von dem Dotter entfernt und auf einem Behausungsmodul befestigt, um die Spannung der Membran zu bewahren, welche wichtig für die spätere Entwicklung ist.
Grundlegende Protokolle für die Gesamtdotter- and die Explantatverfahren werden in diesem Video bereitgestellt, zusätzlich zu Diskussionen über das Für und Wider des Kultivierens von Küken außerhalb der Schale.
Zu letzt behandeln wir die experimentellen Anwendungen einer ex ovo Kultur, und zeigen wie diese Vorgehensweise benutzt wird, um den Zugriff auf die Embryonen für die Mikroskopie und genetische Veränderung von Embryonen in späteren Entwicklungsphasen, zu verbessern.
Procedimento
Das Küken ist ein vielfältiger Modellorganismus, um Entwicklungspfade zu untersuchen, weil die Mehrheit der Entwicklung außerhalb der Mutter stattfindet. Trotzdem verhindert die Eierschale den Zugriff auf den Embryo für einige Arten von Experimenten. Glücklicherweise können die Küken außerhalb der Schale, oder ex ovo, mit allgemein erhältlicher Laborausrüstung, inkubiert werden. In diesem Video werdet ihr die Grundlagen einer ex ovo Kultur, eine Schritt für Schritt Anleitung für zwei verschied…