Eletrofisiologia do Patch Clamp

As membranas celulares neurônios são povoadas com canais de íons que controlam o movimento da carga dentro e fora da célula, regulando assim o disparo de neurônios. Uma técnica extremamente útil para investigar as propriedades biofísicas desses canais é chamada gravação de grampo de remendo. Neste método, os neurocientistas colocam uma micropipette de vidro polida contra uma célula e aplicam sucção para formar uma vedação de alta resistência. Este processo isola um pequeno “patch” de membrana que contém um ou mais canais de íons. Usando um eletrodo dentro da micropipette, os pesquisadores podem “grampear” ou controlar as propriedades elétricas da membrana, o que é importante para a análise da atividade do canal. O eletrodo também permite que mudanças na tensão através da membrana, ou o fluxo de íons através da membrana, sejam registrados.

Este vídeo começa com uma visão geral dos princípios por trás da eletrofisiologia do grampo de remendo, uma introdução aos equipamentos necessários e descrições das várias configurações de patches, incluindo células inteiras, ligadas a células, perfuradas, de dentro para fora e fora de áreas. Em seguida, são delineados os passos-chave de um experimento típico de grampo de remendo de células inteiras, no qual uma curva de tensão de corrente (IV) é gerada. Finalmente, as aplicações de gravação de grampos de remendo são fornecidas para demonstrar como as propriedades biofísicas dos canais de íons, excitabilidade celular e compostos neuroativos são avaliadas nos laboratórios de neurofisiologia hoje.