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Reconstitution d'une protéine transmembranaire, le Ion canal de voltage-dépendants, KvAP, en géant vésicules unilamellaires pour la microscopie et Patch études Clamp
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Reconstitution of a Transmembrane Protein, the Voltage-gated Ion Channel, KvAP, into Giant Unilamellar Vesicles for Microscopy and Patch Clamp Studies
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Reconstitution d'une protéine transmembranaire, le Ion canal de voltage-dépendants, KvAP, en géant vésicules unilamellaires pour la microscopie et Patch études Clamp

DOI:
10.3791/52281-v

•

11:42 min

•

January 22, 2015

•

, , ,
1Institut Curie, Centre de Recherche, CNRS, UMR 168, PhysicoChimie Curie,Université Pierre et Marie Curie, 2Kavli Institute for Brain and Mind,University of California, San Diego, 3Molecular Physiology and Biophysics Section, National Institute for Neurological Disorders and Stroke,National Institute of Health

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:44Giant Unilamellar Vesicle Growth by Electroformation
  • 04:29Giant Unilamellar Vesicle Growth by Gel-assisted Swelling
  • 06:07Harvesting and Transferring GUVs
  • 07:33Patch-clamping GUVs
  • 09:14Results: Microscopy and Patch Clamp Studies of KvAP GUVs
  • 11:03Conclusion

Summary

Tadução automática

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La reconstitution de la protéine transmembranaire, KvAP, dans des vésicules unilamellaires géantes (GUVs) est démontrée par deux méthodes de déshydratation-réhydratation, et - électroformation gonflement assisté gel. Dans les deux procédés, de petites vésicules unilamellaires contenant la protéine sont fusionnées ensemble pour former GUVs qui peuvent ensuite être étudiées par microscopie par fluorescence et de patch-clamp électrophysiologie.

Tags

Keywords: Transmembrane ProteinVoltage-gated Ion ChannelKvAPGiant Unilamellar Vesicles (GUVs)Biomimetic SystemMembrane Associated PhenomenaDehydration-rehydrationElectroformationGel-assisted SwellingSmall Unilamellar VesiclesRehydration BufferAC FieldAgarose GelFluorescence MicroscopyPatch-clampProtein Distribution

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