Journal
/
Bioengenharia
/
Isolamento de células do cólon tumor primário Humanos a partir de tecidos cirúrgicos e cultivando-as Diretamente macias elásticas Substratos para Traction Citometria
JoVE Journal
Bioengenharia
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Bioengenharia
Isolation of Primary Human Colon Tumor Cells from Surgical Tissues and Culturing Them Directly on Soft Elastic Substrates for Traction Cytometry

Isolamento de células do cólon tumor primário Humanos a partir de tecidos cirúrgicos e cultivando-as Diretamente macias elásticas Substratos para Traction Citometria

DOI:
10.3791/52532-v

•

09:28 min

•

June 04, 2015

•

, , , ,
1Department of Mechanical Science and Engineering,University of Illinois at Urbana-Champaign, 2College of Medicine,University of Illinois at Urbana-Champaign, 3Provena Covenant Medical Centre, 4Micro and Nanotechnology Laboratory,University of Illinois at Urbana-Champaign

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:25Collection and Digestion of Surgical Tissue Sample
  • 02:40Dissociation of Tissue Sample into Single Cell Suspension and Culturing Isolated Cells on Substrates with Different Rigidity
  • 04:45Traction Force Microscopy
  • 05:43Immunofluorescence Microscopy Assays
  • 07:10Results: Traction Cytometry and Immunofluorescence Microscopy
  • 08:51Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

A protocol is described to extract primary human cells from surgical colon tumor and normal tissues. The isolated cells are then cultured on soft elastic substrates (polyacrylamide hydrogels) functionalized by an extracellular matrix protein, and embedded with fluorescent microbeads. Traction cytometry is performed to assess cellular contractile stresses.

Tags

Primary Human Colon Tumor CellsSoft Elastic SubstratesTraction CytometryMatrix Mechanical StiffnessAdhesion ReceptorsSignal TransductionCytoskeletonMolecular MotorsMechanosensitivityImmortalized Cell LinesMurine Derived Primary CellsPolyacrylamide HydrogelsExtracellular MatrixFibronectinTraction AssayCellular Contractile StressesImmunofluorescence MicroscopyCell MorphologyCytoskeleton OrganizationVinculinFocal Adhesions

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/52532?article_type=v

Isolamento rápido de células tumorais viáveis ​​circulantes de amostras de sangue de doentes
check_url/pt/52532?article_type=v

Os tecidos músculo esquelético de engenharia a partir de células progenitoras mioblastos murinos e Aplicação da estimulação elétrica
check_url/pt/52532?article_type=v

Citometria de massa: Protocolo para Ajuste Diário e amostras de células em execução em um citômetro de Massa CyTOF
check_url/pt/52532?article_type=v

Recuperação cirúrgica, isolamento e<em> In vitro</em> Expansão de humanos anteriores Cruciate células do ligamento derivados para aplicações em engenharia de tecidos
check_url/pt/52532?article_type=v

Caracterização biomecânica de tecidos moles Humanos Usando recuo e testes de tração
check_url/pt/52532?article_type=v

Isolamento de células de gânglio retiniano murino primário (RGCs) por citometria de fluxo
check_url/pt/52532?article_type=v

Isolamento de células-tronco mesenquimais do periósteo Alveolar humano e efeitos da vitamina D na atividade osteogênica do periósteo-derivado de células
check_url/pt/52532?article_type=v

Medição da rigidez de substratos de Silicone macio para estudos de Mechanobiology, usando um microscópio de fluorescência Widefield
check_url/pt/52532?article_type=v

Padronização da geometria de colônias de células-tronco embrionárias humanas em substratos compatíveis para controlar a mecânica de nível de tecido
check_url/pt/52532?article_type=v

Citometria de fluxo de alta dimensionalidade para análise da função imune de tecidos dissecados de implantes

Read Article