É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 01:00Evaluation of the Purity of Isolated Primary Villous Cytotrophoblasts
- 03:13siRNA Transfection of Human Primary Villous Cytotrophoblasts
- 04:55Preparation of Nuclear Extracts from Cultured Cells
- 05:52Radiolabeling of Single Stranded Oligonucleotide
- 06:50DNA Binding Reaction
- 08:07Results: Syncytin-2 Knowckdown and Visualization of Syncytin-2 DNA-protein Complexes
- 09:14Conclusion
Ce protocole décrit un procédé pour transfecter efficacement ARNsi dans les cytotrophoblastes villeux humaines fraîchement isolées en utilisant la microporation et l'identification des complexes ADN-protéine dans ces cellules. Les cellules transfectées peuvent être contrôlées par Western Blot et des analyses EMSA pendant la période de culture de 4 jours.
