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적외선 형광 염료로 표지 올리고 뉴클레오티드를 사용하여 전기 영동 이동성 시프트 분석을위한 최적화 된 프로토콜

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

An Optimized Protocol for Electrophoretic Mobility Shift Assay Using Infrared Fluorescent Dye-labeled Oligonucleotides

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적외선 형광 염료로 표지 올리고 뉴클레오티드를 사용하여 전기 영동 이동성 시프트 분석을위한 최적화 된 프로토콜

DOI:

10.3791/54863-v

•

09:58 min

•

November 29, 2016

•

Yi-Wen Hsieh, Amel Alqadah, Chiou-Fen Chuang

¹Department of Biological Sciences,University of Illinois at Chicago

Capítulos

00:05Título
00:32Preparation of Gel, Infrared Fluorescent Dye-labeled Probes and Unlabeled Probes
04:49Binding Reaction and Electrophoresis
06:37Imaging
07:35Results: Electrophoretic Mobility Shift Assays Using Purified Proteins and Dye-labeled DNA Probes
08:57Conclusion

Summary

Tadução automática

우리는 여기서 중요한 생물학적 문제를 해결하기 위해 사례 연구와 같은 적외선 형광 염료 표지 DNA 프로브와 함께 정제 된 SOX-2 단백질을 사용하여 형광 전기 영동 이동성 이동 분석 (fEMSA)의 최적화 된 프로토콜을 설명합니다.

Tags

Electrophoretic Mobility Shift Assay Infrared Fluorescent Dye Oligonucleotides Protein-DNA Interactions Biologia Molecular Bioquímica Non-radioactive Probes Native Polyacrylamide Gel TBE Buffer Glycerol Annealing Double-stranded DNA Probes Klenow Fragment EDTA PCR Unlabeled Probes

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