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Study of Endoplasmic Reticulum and Mitochondria Interactions by In Situ Proximity Ligation Assay in Fixed Cells

Estudo do retículo endoplasmático e mitocôndrias Interações por<em> In Situ</em> Proximidade Ligadura Ensaio em células fixas

DOI:
10.3791/54899-v

•

09:34 min

•

December 10, 2016

•

,
1Lund University Diabetes Centre,Lund University, 2INSERM UMR-1060, CarMeN Laboratory, Lyon 1 University, INRA U1235, INSA of Lyon,Rockefeller and Charles Merieux Lyon-Sud Medical Universities

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:42Fixation and Blocking of Cells
  • 03:46Primary Antibodies and Proximity Ligation Assay Probes
  • 06:09Amplification and Imaging Preparation
  • 07:48Results: In Situ Proximity Ligation Assay in HuH7 Cells
  • 08:52Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui, descrevemos um procedimento para visualizar e quantificar com alta sensibilidade as interações endógenos entre o retículo endoplasmático e mitocôndrias nas células fixas. O protocolo apresenta um otimizado no ensaio de ligação de proximidade situ visando o inositol 1,4,5-trifosfato de receptor / proteína regulada por glucose 75 / complexo D canal de ânions / ciclofilina dependente da tensão na interface membrana associada à mitocôndria.

Tags

Keywords: Endoplasmic ReticulumMitochondriaIn Situ Proximity Ligation AssayFixed CellsVDAC1IP3R1Mitochondrial Associated MembraneImmunofluorescenceBiomedical ResearchCell FixationCell PermeabilizationBlockingImmunostaining

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