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Engenharia de fatores artificiais para manipular Especificamente splicing alternativo em células humanas
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Genética
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JoVE Journal Genética
Engineering Artificial Factors to Specifically Manipulate Alternative Splicing in Human Cells
DOI:

10:06 min

April 26, 2017

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Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:51Construction of the PUF RNA-binding Domain Scaffold with Customized RNA Binding Specificity by Overlapping PCR
  • 02:05Transfection of Engineered Splicing Factors (ESFs) for Modulation of Exon Inclusion and Alternative Splice-site Use
  • 03:43Cell Harvest and Identification of Spliced Isoforms
  • 06:24Modulation of Endogenous Bcl-x Splicing and Apoptosis by ESFs
  • 08:23Results: Subcellular Localization of ESFs in Transfected HeLa Cells
  • 09:30Conclusion

Summary

Tadução automática

Este relatório descreve um método de bioengenharia para conceber e construir novos factores de splicing artificial (ASFS) que modulam especificamente a splicing de genes alvo em células de mamífero. Este método pode ser expandido para manipular vários fatores artificiais para manipular outros aspectos do metabolismo do ARN.

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