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Un enfoque ADN afinidad G-cuádruplex para la purificación de enzimáticamente activa G4 Resolvase1
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Capítulos
- 00:05Título
- 00:54Lyse Bacterial Pellets Expressing Human Recombinant G4 Resolvase1 (rG4R1)
- 03:06Prepare G4-magnetic Beads
- 04:07Bind Histidine-tagged rG4R1 to Cobalt Beads
- 05:47Elute rG4R1 from Cobalt Beads
- 07:07Bind rG4R1 to G4-bound SPB and Elute in an ATP-dependent Manner
- 08:55Results: Analysis and Quantification of Catalytically Active, Purified rG4R1
- 10:06Conclusion
G4 Resolvase1 se une a estructuras de G-quadruplex (G4) con la afinidad reportado más apretado para una proteína de unión-G4 y representa la mayoría de la G4-ADN anulación actividad en las células HeLa. Se describe un nuevo protocolo que aprovecha la afinidad y anulación actividad dependiente de ATP de G4-Resolvase1 para purificar específicamente G4R1 recombinante catalíticamente activo.
