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Analizzare l'attività della proteina con l'ATP radioattivato
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Assaying Protein Kinase Activity with Radiolabeled ATP
DOI:

08:05 min

May 26, 2017

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Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:36Kinase Purification Resources and General Immunoprecipitation Pipeline
  • 01:49Kinase Reactions and SDS-PAGE
  • 02:45Gel Staining and Drying
  • 04:18Autoradiogram and Scintillation Counts
  • 05:57Results: Differences in Activity Between ERK2 and ERK2 Mutants
  • 07:02Conclusion

Summary

Tadução automática

Le chinasi di proteine ​​sono enzimi e stadi di segnalazione altamente evoluti che sono critici per la trasduzione del segnale inter-e intracellulare. Presentiamo un protocollo per la misurazione dell'attività di chinasi mediante l'uso di trifosfato adenosina radiomarcato ([γ-32P] ATP), un metodo affidabile per aiutare a spiegare la regolazione cellulare di segnalazione.

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