É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 01:07Preparation of Materials
- 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
- 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
- 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
- 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
- 10:54Conclusion
Ett protokoll för hög precision FRET-experiment på den enda molekylnivån presenteras här. Dessutom kan denna metod användas för att identifiera tre konformationella tillstånd i den ligandbindande domänen av N-metyl-D-aspartat (NMDA) -receptorn. Att bestämma exakta avstånd är det första steget mot att bygga strukturella modeller baserade på FRET-experiment.
