Transkraniyal elektrik beyin stimülasyonu uyarı Rodents

Bu cerrahi prosedürün genel amacı, uyarı kemirgenlerinde güvenilir ve tekrarlanan transkraniyal elektriksel beyin stimülasyonuna izin vermektir. Bu yöntem, motor fonksiyonu veya açıkları iyileştirmek için beyin ağlarının hedefli elektriksel stimülasyonu ile nöromodülasyon ve nöroplastisite alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, uyarı kemirgenlerinde rahatsızlığa neden olmadan tekrarlanan non-invaziv elektriksel beyin stimülasyonu seanslarına ve davranışsal ölçümlerine minimum müdahaleye izin vermesidir.

Bu yönteme yeni olan kişiler, göğüsten başa tünelleme için doğru yolu bulmanın yanı sıra elektrot soketi yerleştirmeden önce kemik hazırlığının deneyimsiz araştırmacılar için gerçekleştirilmesi genellikle zor olduğu için mücadele edebilir. Bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik öneme sahiptir, çünkü elektrot soketinin yerleştirilmesi için cerrahi adımların yanı sıra stimülasyon için elektrot hazırlama ve yerleştirme deneylerin başarısı için çok önemli olacaktır. Doktora Adayımız Stephanie Haschka, uyarı farelerinde NEBS prosedürlerinin gerçekleştirilmesinde yardımcı olacaktır.

Sunucu}Kemirgeni ameliyat masasına göğsüne yerleştirerek başlayın. Traş edilmiş kafa derisini antiseptik ajana batırılmış bir çubukla dezenfekte edin. Kurumaya bırakın.

Daha sonra anestezi derinliğini kontrol ettikten sonra cildi bistüri ile rostral göz hizasından orta kulak hizasına kadar tek sıra halinde kesin. Daha sonra, fareyi sırtüstü pozisyona getirin, böylece göğüs açığa çıkar ve göğsü dezenfekte eder. Sağ göğsün yan derisini iki parmağınızla gerin ve kraniyal oryantasyonda düz bir sagital kesim yapın.

Cildi sol ana göğüs kasından atravmatik olarak ayırarak deri altı bir kese oluşturun, bunu küçük makası tekrar tekrar açarak yapın. Daha sonra, hayvanı sağ tarafına çevirin, göğüs kesesine çıkmak için açık kafa derisinin sol oksipital köşesinden kablo yolunu boyun boyunca tünelleyin. Homeostatik forseps kullanarak yüzeysel fasyaya nüfuz ederek.

Keskin tellerin sapmasına izin vermeden platin elektroda bağlı elektrot kablosunun ucunu tutmak için homeostatik forsepsleri dikkatlice açın. Elektrot, koterleme noktası kemirgenin sol arka bacağına doğru yönlendirilmiş torbaya girene kadar kabloyu tünelden çekin. Ardından kemirgeni yüzüstü pozisyona geri çevirin.

Daha sonra, platin plakayı steril sentetik örgülü emilmeyen bir sütür ile karşılıklı iki köşe deliğindeki pektoral fasyaya sabitleyin. Benzer şekilde, kabloyu gevşek bir düğümle fasyaya takın ve doku tünelinin girişinden önce hafif bir halka oluşturun. Son olarak, kesiğin boyutuna bağlı olarak cildi üç ila dört kutanöz dikişle kapatın.

Kafatasındaki bağ dokusu olan periosteumu, neşter ile yanlara doğru kazıyarak başlayın ve pamuklu çubuklarla iyice silin. Kesiğin dört köşesindeki bağ dokusunu bulldog kelepçeleriyle sabitleyin, ardından ameliyat alanını açık tutmak için yanal olarak asılmasına izin verin. Ardından, kemik yüzeyini ve dokuyu pamuklu çubuklarla temizlemek için% 0.9 salin uygulayın.

Daha sonra kemik yüzeyini %3 Hidrojen Peroksit ile temizleyin. Görünür hale geldikçe periost kalıntılarını çıkarmak için pamuklu çubuk kullanın. Sabitleme vidaları yatıştırıcı yapışmayı artıracağından, vida boyutuna uygun bir matkap ucu seçin.

Bir el matkabı ile ön delme ve ardından bir kemik matkabı ile hafif parçacık basıncı uygulayarak iki farklı kemik plakasına iki yuva deliği yerleştirin. Bu videoda gösterildiği gibi implante edilmiş bir elektrot durumunda, tünelli kablonun gelecekteki fiksasyonu için sağ arka parietal kemikte bulunan üçüncü bir delik açın. Plastik vidaları çukurlara yerleştirin ve ilk sürtünme hissedilene kadar vidalayın.

Ardından üç adet ek 180 derece vida dönüşü gerçekleştirin. Vidanın stabilitesini kontrol etmek için forseps kullanın ve yeterince sıkı değilse bir tur daha ekleyin. Kotiyi açın ve yaklaşık beş dakika önceden ısıtın.

Doku tünelinden çıkan kabloyu oksipital olarak sağ parietal vidanın etrafına sarın ve ardından sargının arkasında yaklaşık bir santimetre kablo bırakarak kesin. Kablonun ucundaki yalıtımı bir neşterle dikkatlice soyun. Ardından sarılmış kabloyu siyanoakrilat yapıştırıcı ile vidaya ve kemiğe sabitleyin.

Ardından, konektöre ve karşı elektrot kablosunun çıplak tellerine az miktarda kurşunsuz kalay koter uygulayın ve kalay koter eriyene kadar koterleme ucuna dokunurken önceden koterlenmiş her iki parçayı birbirine kısaca bastırarak her ikisini de bağlayın. Kablonun aşırı metal ısınmasını ve ardından doku hasarını önlemek için koterleme ucunu hemen çıkarın. Motor korteksin uyarılması için dört milimetre çapında bir soket kullanın.

İnce tırtıklı uçlu forsepsli özel yapım tES elektrot soketini alın ve soketin alt kenarına ince bir tabaka siyanoakrilat yapıştırıcı sürün. Soketin inter-medial sınırı doğrudan sagital sütürde bitmeli ve coddle iç sınırı bregma ile sona ermelidir. Ardından, yapıştırıcı sertleşene kadar soketi kemiğe kısa bir süre bastırın.

Ve soket alanındaki kemiğin üzerinde yansıtıcı yapıştırıcı olmadığından emin olmak için bir ışık kullanın. Soket yerleştirildikten ve gelecekteki stimülasyon alanı yapıştırıcıdan arındırıldıktan sonra, bu konumda akımın şöntlenmesine yol açabilecek bir sıvı köprüsünü önlemek için soketin yan sınırını komşu dokuya küçük bir damla siyanoakrilat yapıştırıcı ile kapatın. Ardından tüm vidaları siyanoakrilat yapıştırıcı ile örtün.

Daha sonra, iki bileşeni küçük bir silikon tüp veya cam içinde akrilik çimentoya karıştırın. Viskoz hale gelir gelmez, soketin kalan kenarlarını kemiğe kapatmak için bir diş spatulası ile uygulayın. Son olarak, tüm kafatasını, vidaları, karşı elektrot kablosunu ve soketin 1 / 3'üne kadarını dental akrilik çimento ile kaplayın.

Kemiğin tamamı kaplandıktan ve çimento sertleştikten sonra, bulldog kelepçelerini çıkarın ve cildi yeniden konumlandırın. tES elektrot soketini yarı% 0.9 salin doldurarak başlayın ve hava kabarcıklarını çıkarın. Katodal tEs seanslarından önce klorlamayı kontrol edin ve gerekirse gümüş, gümüş klorür elektrodunu yeniden klorlayın.

Anodal tES seanslarından önce, stimülasyon sırasında iyi iletkenlik sağlamak için önceki stimülasyonlardan kaynaklanan olası aşırı gümüş klorür birikintilerini zımpara kağıdı ile temizleyin. Ardından tES elektrot kapağını vidalayın. Kabloları kafadaki iki konektöre bağlayın.

Daha sonra kemirgeni, serbest dolaşıma izin veren kafesin üzerindeki bir fırdöndüye bağlı kablolarla deney kafesine yerleştirin. Stimülatörü açın ve stimülasyon parametrelerini ayarlayın. Son olarak, stimülasyonun sona ermesinden sonra, kabloları ayırın, kafadaki elektrot kapağını sökün ve soketi bir pamuklu çubukla temizleyin ve kurulayın.

Sonuçlar, morfolojik değişiklikle değerlendirilen mikroglia aktivasyonunun ilk olarak metrekare başına 31.8 amperde meydana geldiğini, nöro-dejenerasyonun ilk belirtilerinin ise metrekare başına 47.8 amperde tespit edildiğini gösterdi. Birden dörde kadar olan örnekler pozitif olarak derecelendirildi. Anestezi, DCS'ye verilen yanıtın büyüklüğünü etkiledi, çünkü uyanık sıçanlarda floro-JC pozitif dejenere nöronlara sahip beyin dilimlerinin yüzdesi metrekare başına 47.8 amperde daha yüksekti.

Ayrıca, yüksek yoğunluklardaki davranışsal veya moleküler etkilerin, düşük yoğunluklu etkilere kıyasla mekanik olarak farklı olması beklenmektedir. Bir kez ustalaştıktan sonra, göğüs elektrodu yerleştirme de dahil olmak üzere bu teknik, uygun şekilde yapılırsa 40 ila 45 dakika içinde yapılabilir. Cerrahi olarak karşı elektrot yerleştirilmezse genellikle 10 ila 15 dakikalık daha kısa bir süre gerekir.

Bu videoyu izledikten sonra, farklı NEBS simülasyon teknikleri için kalıcı bir elektrot kurulumunun nasıl yerleştirileceğini ve uyarı kemirgenlerinde bir eTS'nin nasıl uygulanacağını iyi anlamış olmalısınız. Elektrotlar stimülasyondan önce yeterince hazırlanmazsa, elektrik akımlarıyla çalışmanın kemirgen için zararlı olabileceğini unutmayın. Katodal stimülasyondan önce elektrotun yeniden klorlanması veya anodal stimülasyondan önce kalıntıların uzaklaştırılması gibi önlemler bu prosedürü gerçekleştirmeden önce daima alınmalıdır.