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高分辨率荧光原位杂交在果蝇胚胎和组织中使用 Tyramide 信号放大

JoVE Journal
Genética

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High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

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高分辨率荧光原位杂交在果蝇胚胎和组织中使用 Tyramide 信号放大

DOI:

10.3791/56281-v

•

14:21 min

•

October 19, 2017

•

Allison Jandura², Jack Hu, Ronit Wilk², Henry M. Krause²

¹The Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research,University of Toronto, ²Department of Molecular Genetics,University of Toronto

Capítulos

00:05Título
01:09PCR Amplification of cDNA Templates from Plasmids
03:43In vitro Transcription to Generate Antisense Probes
05:25Drosophila Tissue Collection and Fixation
07:51In Situ Hybridization
09:05Probe Detection
11:05Antibody Detection using Tyramide
12:01Results: Robust Detection of RNA in Whole Drosophila Embryos and Dissected Tissues
13:02Conclusion

Summary

Tadução automática

所描述的 rna原位杂交协议允许检测整个果蝇胚胎或解剖组织中的 rna。使用96井孔板和 tyramide 信号放大, 记录可以检测高分辨率, 灵敏度和吞吐量, 并以较低的成本。

Tags

Fluorescent In Situ Hybridization Drosophila RNA Tyramide Signal Amplification Subcellular Distribution High-throughput 96-well Plate PCR Bacterial Culture Plasmid DNA Ethanol Precipitation Centrifugation

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