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Inriktning cystein tioler för in Vitro platsspecifika Glycosylation av rekombinanta proteiner
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Imunologia e Infecção
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JoVE Journal Imunologia e Infecção
Targeting Cysteine Thiols for in Vitro Site-specific Glycosylation of Recombinant Proteins
DOI:

11:25 min

October 04, 2017

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Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
  • 03:44Uniform 15N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
  • 05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
  • 07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
  • 08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
  • 10:11Conclusion

Summary

Tadução automática

Biokemiska och strukturella analyser av glykosylerat proteiner kräver relativt stora mängder homogena prover. Här presenterar vi en effektiv kemisk metod för platsspecifika glycosylation av rekombinanta proteiner renas från bakterier genom att rikta reaktiva Cys tioler.

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