June 29th, 2018
Anxiété-comme le comportement des rats testés par l’élévation plus labyrinthe varie fortement en fonction de l’environnement de test. Ici, nous montrons comment les paramètres de l’appareil, surtout des structure de bras, affectent comportement sur le labyrinthe et nous expliquer un protocole fiable pour détecter les effets des médicaments anxiolytiques. Ce rapport contribuera à la recherche de l’anxiété.
L’objectif global de cette expérience est de mesurer l’anxiété chez les rats, à l’aide du labyrinthe surélevé plus approprié. La principale conclusion de cette étude est que la sensibilité de détection de l’effet du médicament anxiolytique peut changer en fonction des caractéristiques de l’appareil de labyrinthe transversal surélevé. Cette étude peut aider les chercheurs à mettre en place l’appareil du labyrinthe en laboratoire, adapté à leur objectif expérimental, et assurer un excellent enregistrement des données.
La démonstration de la procédure sera faite par un chercheur invité de mon laboratoire. Pour commencer, installez l’appareil de labyrinthe surélevé et plus dans un conteneur de placard personnalisé. Le cadre métallique en forme de plus du labyrinthe doit être élevé d’environ un demi-mètre du sol.
Maintenez une luminosité constante dans tout le labyrinthe à l’intensité requise. Au point central supérieur, montez une caméra vidéo numérique pour enregistrer et surveiller les essais. Fixez maintenant les bras du labyrinthe sur le cadre.
Il existe deux types de bras ouverts, avec ou sans rebords de 5 mm sur les côtés. Il existe également deux types de bras fermés. Les parois peuvent être translucides ou opaques.
Fixez la plate-forme centrale carrée entre les bras. Les surfaces de la plate-forme centrale et de la piste du bras du labyrinthe sont de couleur noire pour un meilleur suivi des animaux par l’analyse comportementale automatisée. Maintenant, avec les bras en place, ajustez l’intensité de l’éclairage, de sorte qu’il y ait environ 100 lux à la surface de la partie d’extrémité distale de chaque bras et à la plate-forme centrale.
Avant chaque test, nettoyez l’ensemble de l’appareil avec une solution d’éthanol à 70 %, puis essuyez-le avec de l’eau distillée. Cliquez sur le bouton d’enregistrement de l’enregistreur à disque dur pour commencer à collecter des images à partir de la caméra vidéo numérique. Si l’équipement fonctionne, effectuez le test.
Commencez le test en plaçant le rat sur la plate-forme centrale, de sorte qu’il soit face à un bras ouvert, et fermez les portes du placard. Laissez ensuite l’exploration libre sur l’appareil pendant cinq minutes. Le résultat de l’expérience peut varier selon que le rat est évalué face à un bras ouvert ou croisé.
Il est préférable de toujours placer les rats, reposant sur le bras ouvert pour éviter le gel, lors de la première entrée dans le bras fermé. Au bout de cinq minutes, arrêtez l’enregistrement pour terminer le test. Remettez ensuite le rat dans sa cage et comptez le nombre d’excréments et d’urines dans le labyrinthe avant de le nettoyer.
Effectuez toujours l’analyse comportementale à l’aide d’un logiciel d’observation manuelle et d’analyse automatisé. À partir de la vidéo, enregistrez manuellement le nombre d’entrées que le rat fait dans les bras du labyrinthe. Une entrée est définie comme n’importe quel cas où les quatre pattes sont sur le bras.
Notez également le temps passé dans chaque bras et le nombre de postures d’assistance étirées effectuées pendant que le rat est sur la plate-forme centrale, face à un bras ouvert et reculé dans un bras fermé. Effectuez ces mesures à l’aide d’un chronomètre et d’un compteur pendant les cinq minutes de test. Pour effectuer une analyse automatisée, ouvrez l’enregistrement vidéo dans un logiciel commercial.
Le logiciel suit l’animal dans le labyrinthe, en utilisant le contraste entre l’animal et le sol sombre. Attribuez d’abord l’animal à une goutte de contraste d’une taille spécifique, puis attribuez le centre de la goutte comme point de suivi. Ensuite, pour le test complet de cinq minutes, demandez au logiciel d’enregistrer la distance parcourue, le temps passé dans différentes positions sur les bras ouverts et le temps total passé sur les bras ouverts et fermés.
Parfois, l’analyse automatisée ne permet pas de faire la distinction entre les entrées et les non-entrées dans les armes. Par conséquent, nous recommandons que l’observation manuelle soit toujours effectuée en plus de l’analyse automatisée. Les résultats du comportement exploratoire des rats sur le labyrinthe surélevé avec différents modèles de bras ouverts et fermés, montrent que les rats passent plus de temps sur les bras ouverts avec des rebords que sur les bras ouverts sans rebords.
Ils ont également fait plus d’entrées sur ces bras, donc les rebords augmentent probablement le comportement d’exploration sur les bras ouverts. Les rats ont montré une posture significativement moins étirée sur des bras fermés à parois transparentes que sur des bras fermés à parois opaques. Suggérant que les parois transparentes et fermées des bras diminuaient le comportement anxieux.
Les rats ont également passé plus de temps sur les segments distaux des bras ouverts lorsque les bras fermés avaient des parois transparentes, que lorsque les bras fermés avaient des parois opaques. De plus, l’exploration distale à bras ouvert était significativement plus faible dans les labyrinthes sans rebords et avec des combinaisons de bras opaques, que dans les rebords et les combinaisons de bras transparents. Par conséquent, la sensibilité de détection peut être modifiée en fonction de la combinaison de conceptions de bras utilisées.
Pour vérifier les différences de sensibilité de détection entre les différents types de conception de bras, une autre expérience a été réalisée à l’aide du médicament anxiolytique Diazepam. En bref, l’effet d’un traitement à haute dose de diazépam a été détecté dans l’appareil à paroi opaque sans rebords, mais pas dans l’appareil à paroi transparente avec rebords. Lors de cette procédure, il est important de se rappeler de traiter tous les animaux dans les mêmes conditions expérimentales et de s’assurer que tous les animaux sont placés face au même bras ouvert ou fermé au début de chaque test.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez comprendre comment configurer l’appareil de labyrinthe transversal surélevé. Il est important de se rappeler que les résultats expérimentaux peuvent varier en fonction de la conception du bras. Nous vous recommandons donc d’utiliser des bras adaptés à vos objectifs expérimentaux.
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Cette étude examine comment l'environnement de test du labyrinthe surélevé influence le comportement semblable à l'anxiété chez les rats. Elle souligne l'importance des paramètres de l'appareil, en particulier la structure des bras, dans la détection des effets des médicaments anxiolytiques.