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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
The Transwell Migration Assay
  • 00:00Visão Geral
  • 00:42Background on the Transwell Chamber
  • 02:21Experimental Considerations
  • 03:43Protocol for Measuring Migration of Adherent Cells
  • 05:13Applications
  • 07:52Summary

O Ensaio de Migração Transwell

English

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Visão Geral

A migração de células em resposta a sinais químicos é crucial para o desenvolvimento, imunidade e estados de doenças, como o câncer. Para quantificar a migração celular, um simples ensaio foi desenvolvido em 1961 pelo Dr. Stephen Boyden, que agora é conhecido como o ensaio de migração transwell ou ensaio de câmara de Boyden. Esta configuração consiste em uma inserção que separa os poços de uma placa multiwell em compartimentos superiores e inferiores. As células cuja migração deve ser estudada são semeadas no compartimento superior e a solução de quimioterapia é colocada no compartimento inferior. Após a incubação, a contagem das células no compartimento inferior permite quantificação da migração induzida por quimioattractants.

Este vídeo revisará a configuração experimental comumente usada para estudos de migração celular. Em seguida, vamos destacar algumas considerações-chave, e delinear um protocolo generalizado para executar um experimento envolvendo células aderentes. Por fim, revisaremos várias adaptações desta configuração que estão sendo utilizadas atualmente para estudar diferentes fatores que afetam a migração.

Procedimento

O ensaio de migração transwell é uma técnica clássica que permite aos cientistas quantificar o movimento celular. A migração refere-se à capacidade de uma célula de se mover individualmente ou em clusters. Os movimentos celulares são possíveis através da reestruturação precisa de seu citoesqueleto e a migração geralmente ocorre em resposta a estímulos que agem como pistas. Hoje, discutiremos o ensaio de migração transwell, que utiliza uma simples configuração de câmara para avaliar a migraç…

Declarações

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. The Transwell Migration Assay. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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