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Systèmes inductibles et constitutives génétique In Vivo modification des hépatocytes de souris à l’aide d’Injection dans la veine queue hydrodynamique

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Constitutive and Inducible Systems for Genetic In Vivo Modification of Mouse Hepatocytes Using Hydrodynamic Tail Vein Injection

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Systèmes inductibles et constitutives génétique In Vivo modification des hépatocytes de souris à l’aide d’Injection dans la veine queue hydrodynamique

DOI:

10.3791/56613-v

•

09:35 min

•

February 02, 2018

•

Eric K. Hubner², Christian Lechler, Thomas N. Rösner, Birgit Kohnke-Ertel, Roland M. Schmid, Ursula Ehmer

¹Department of Medicine II, Klinikum rechts der Isar,Technische Universität München, ²Department of Pneumology, Center for Medicine,Medical Center University of Freiburg

Capítulos

00:05Título
00:52Recombinatorial Cloning to Generate Ready-for-injection Clones
02:23Hydrodynamic Tail Vein Injection
04:22Induction of Transfected CreER with Tamoxifen
05:33Induction of Tetracycline-dependent Gene or shRNA Expression
06:35Preparation of Mouse Liver for Analysis by Immunostaining
07:30Results: Constitutive and Inducible Gene Expression in the Liver Following HTVI
08:47Conclusion

Summary

Tadução automática

Injection dans la veine des vecteurs d’intégration axée sur le transposon queue hydrodynamique permet une transfection stable d’hépatocytes murins in vivo. Nous présentons ici un protocole pratique pour les systèmes de transfection qui permet l’expression constitutive à long terme d’un transgène seule ou combinée expression constitutive et doxycycline-induisible d’un transgène ou miR-shARN dans le foie.

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