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Mit CRISPR/Cas9 gen untersuchen die Onkogene Aktivität des mutierten Calreticulin in Cytokine abhängigen hämatopoetischen Zellen bearbeiten
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Capítulos
- 00:05Título
- 00:44Cloning sgRNA Oligos
- 01:08Digestion of LentiGuide-puroVector
- 02:04Ligation of Annealed Oligos into Digested Backbone
- 03:02Generation of Cell Lines Stably Expressing spCas9
- 05:40Reporter Assay for Cas9 Activity
- 06:10Spinfection of sgRNAs into Cas9 Expressing Cells
- 06:31Ba/F3 Cellular Transformation and Positive Selection using m-IL3 Withdrawal
- 07:23Results: Use of CRISPR/Cas9 Tool and Ba/F3 Cellular Transformation to Study Oncogenic Potential of Mutated Calreticulin
- 09:02Conclusion
Gezielte gen bearbeiten CRISPR/Cas9 hat das Verständnis der biologischen Funktionen der Gene erheblich erleichtert. Hier nutzen wir die CRISPR/Cas9-Methodik zu Modell Calreticulin Mutationen in hämatopoetischen Zellen Zytokin-abhängige um ihre onkogenen Aktivität zu studieren.
