Journal
/
Pesquisa do Câncer
/
שימוש CRISPR/Cas9 ג'ין עריכה כדי לחקור את פעילות Oncogenic Calreticulin מוטציה בתאים Hematopoietic תלויי ציטוקין
JoVE Journal
Pesquisa do Câncer
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Pesquisa do Câncer
Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

שימוש CRISPR/Cas9 ג'ין עריכה כדי לחקור את פעילות Oncogenic Calreticulin מוטציה בתאים Hematopoietic תלויי ציטוקין

DOI:
10.3791/56726-v

•

10:21 min

•

January 05, 2018

•

,
1Division of Hematology, Department of Medicine,Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, 2Broad Institute, 3Dana-Farber Cancer Institute,Harvard Medical School

Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:44Cloning sgRNA Oligos
  • 01:08Digestion of LentiGuide-puroVector
  • 02:04Ligation of Annealed Oligos into Digested Backbone
  • 03:02Generation of Cell Lines Stably Expressing spCas9
  • 05:40Reporter Assay for Cas9 Activity
  • 06:10Spinfection of sgRNAs into Cas9 Expressing Cells
  • 06:31Ba/F3 Cellular Transformation and Positive Selection using m-IL3 Withdrawal
  • 07:23Results: Use of CRISPR/Cas9 Tool and Ba/F3 Cellular Transformation to Study Oncogenic Potential of Mutated Calreticulin
  • 09:02Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

ג'ין יישוב עריכה באמצעות CRISPR/Cas9 הנחתה במידה רבה את ההבנה של פונקציות ביולוגיות של גנים. כאן, אנו מנצלים את המתודולוגיה CRISPR/Cas9 כדי דגם calreticulin מוטציות בתאים hematopoietic תלויי-ציטוקין לשם פעילותם oncogenic למידה.

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9Gene EditingCalreticulinOncogenic ActivityCytokine Dependent Hematopoietic CellsHematological MalignanciesLentiGuide-Puro VectorBsmB1 Restriction EnzymePhosphataseLigationSTBL3 CellsHEK293T CellsTransfection

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/56726?article_type=v

ה<em> תסיסנית</em> דגם גידול דיסק דמותי: ויזואליזציה וכימות של ביטוי גנים סרטניים הפולשנות שימוש פסיפסים גנטי
check_url/pt/56726?article_type=v

ייצור של הלשון מטריצה חוץ-תאית, שיחזור של הלשון קרצינומה של תאים קשקשיים במבחנה
check_url/pt/56726?article_type=v

העשרה Phosphopeptide בשילוב עם ספקטרומטר מסה ללא תווית כמותיים כדי לחקור את Phosphoproteome סרטן הערמונית
check_url/pt/56726?article_type=v

החקירה של תלות גנטית באמצעות מבחני תחרות המבוססות על CRISPR-Cas9
check_url/pt/56726?article_type=v

שימוש CRISPR/Cas9 כדי לשדוד את GM-שדרתי ב-T מכונית תאים
check_url/pt/56726?article_type=v

שליטה מרחבית וטמפורלית של מלנומה מורין ייזום מוטציה תאי גזע מלנוציט
check_url/pt/56726?article_type=v

היתוך גנים אונגניים באמצעות שרשרת מעוגנת התגובה השרשרת מעוגן ואחריו רצף הדור הבא
check_url/pt/56726?article_type=v

בידוד והתרחבות של Cy, ציטוטוקאין ציטוטופין המושרה הרוצח T תאים לטיפול בסרטן
check_url/pt/56726?article_type=v

מיפוי קשרי מבנה-פונקציה של גורמי שעתוק אונקוגניים מופרעים באמצעות ניתוח תמלול
check_url/pt/56726?article_type=v

הערכה במבחנה של טרנספורמציה אונקוגנית בתאי אפיתל ממ"ר אנושיים

Read Article