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Um ensaio de Blot Dot quantitativa para titulação de AAV e seu uso para avaliação funcional do vírus Adeno-associado Assembly-ativação de proteínas
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A Quantitative Dot Blot Assay for AAV Titration and Its Use for Functional Assessment of the Adeno-associated Virus Assembly-activating Proteins

Um ensaio de Blot Dot quantitativa para titulação de AAV e seu uso para avaliação funcional do vírus Adeno-associado Assembly-ativação de proteínas

DOI:
10.3791/56766-v

•

14:49 min

•

June 12, 2018

•

, , ,
1Department of Molecular and Medical Genetics,Oregon Health & Science University, 2Department of Molecular Microbiology and Immunology,Oregon Health & Science University

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:46Production of AAV in HEK 293 Cells by Plasmid DNA Transfection
  • 02:50Recovery of Viral Particles, and Treatment with Serratia marcescens Endonuclease and Proteinase K
  • 04:20Phenol-choloroform Extraction, Ethanol Precipitation, and Preparation of Plasmid DNA Standards
  • 05:55Dot Blot Assay
  • 08:46Hybridization and Washing
  • 10:50Results: AAV Titration and Functional Assessment of AAP Proteins Using a Quantitative Dot Blot Assay
  • 12:58Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Este manuscrito detalha um ensaio de mancha de ponto simples para quantificação da concentração de vírus adeno-associado (AAV) e sua aplicação para estudar o papel da montagem-ativando proteínas (AAPs), uma classe nova de proteínas virais não estruturais encontrados em todos os vírus adeno-associados sorotipos, em promover a montagem de capsids derivado cognatos e heterólogos serótipos AAV.

Tags

Keywords: Quantitative Dot BlotAAV TitrationAAV Assembly-activating ProteinsAAV Vector QuantitationHEK 293 Cell TransfectionVirus ProductionAAV RecoveryCell Debris Pelleting

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