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Engenharia 'Dourada' fluorescência por pressão seletiva de incorporação de aminoácidos não-canônicos e análise de proteínas por espectrometria de massa e fluorescência
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1Institute of Chemistry L 1, Department of Biocatalysis,Technical University of Berlin, 2Institute of Chemistry PC 14, Department of Bioenergetics,Technical University of Berlin, 3Institute of Chemistry TC 7, Department of Physical Chemistry/Molecular Material Sciences,Technical University of Berlin
Capítulos
- 00:05Título
- 01:46Recombinant Protein Expression
- 04:05Target Protein Purification via Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography
- 05:20Intact Protein Mass Analysis by High-performance Liquid Chromatography Coupled to Electrospray Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry
- 06:38Fluorescence Lifetime Measurements and Decay-associated Spectra of GdFP
- 07:59Results: Gold Fluorescent Protein Analysis by Mass Spectrometry and Fluorescence
- 10:13Conclusion
Biologia sintética permite a engenharia de proteínas com propriedades sem precedentes usando a inserção co-translational de aminoácidos não-canônicas. Aqui, apresentamos como uma variante espectralmente avermelhado de um fluoróforo GFP-tipo com propriedades espectroscópicas de fluorescência romance, denominado proteína fluorescente "ouro" (GdFP), é produzida em Escherichia coli através de incorporação de pressão seletiva (SPI).
