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Optimizar la incorporación genética de química sondas en GPCRs para foto-reticulación asignación y la química de Bioorthogonal en células de mamífero vivo
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Química
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JoVE Journal Química
Optimizing the Genetic Incorporation of Chemical Probes into GPCRs for Photo-crosslinking Mapping and Bioorthogonal Chemistry in Live Mammalian Cells
DOI:

14:02 min

April 09, 2018

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:11Fluorescence-based Screening of Incorporation Efficiencies
  • 04:22Genetic Incorporation of ncAAs into GPCRs
  • 08:21Ultrafast Bioorthogonal Labeling of GPCRs on Live Mammalian Cells
  • 11:11Results: Incorporation of Chemical Probes into GPCRs in Mammalian Cells for Cross-linking and Imaging Studies
  • 12:52Conclusion

Summary

Tadução automática

Un análisis simplista de la fluorescencia se presenta para evaluar la eficiencia de amino-acil-tRNA-sintetasa/tRNA pares no-canónico-aminoácidos (ncAAs) incorporar las proteínas expresadas en células de mamíferos. Se describe la aplicación de ncAAs estudiar receptores acoplado proteína G (GPCRs), incluida la asignación de foto-reticulación de enlace sitios bioorthogonal GPCR etiquetado en células vivas.

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