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1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital
Capítulos
- 00:05Título
- 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
- 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
- 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
- 07:48Conclusion
Un protocolo para rápido CRISPR/Cas9-mediado interrupción de genes en ratón y células hematopoyéticas primarias humanas se describe en este artículo. Cas9 sgRNA ribonucleoproteínas se introducen a través de electroporación con sgRNAs generado a través de transcripción en vitro y Cas9 comercial. Alta eficiencia edición se logra con tiempo limitado y costos financieros.
