Journal
/
Bioquímica
/
Generation av infödda, otaggade Huntingtin Exon1 Monomer och fibriller med en SUMO Fusion strategi
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Generation of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Using a SUMO Fusion Strategy
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Generation av infödda, otaggade Huntingtin Exon1 Monomer och fibriller med en SUMO Fusion strategi

DOI:
10.3791/57506-v

•

11:22 min

•

June 27, 2018

•

, , ,
1Laboratory of Molecular and Chemical Biology of Neurodegeneration,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:53Cell Lysis and Purification of His6-SUMO Httex1 Fusion Protein by Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC)
  • 02:56Cleavage of the His6-SUMO-tag and HPLC Purification
  • 06:06Disaggregation and Resolubilization of Httex1 Proteins
  • 07:53Results: Characterization of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Prepared via SUMO Fusion
  • 09:52Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Här presenterar vi ett robust och optimerade protokoll för produktion av milligram mängder infödda, tagg-fria monomerer och fibriller av den exon1 av proteinet Huntingtin (Httex1) baserat på övergående fusion av små ubiquitin relaterade modifierare (SUMO).

Tags

Keywords: Native Huntingtin Exon1SUMO Fusion StrategySDS-PAGE AnalysisIMAC PurificationHPLC PurificationDTTL-cysteineTrifluoroacetic AcidAggregation-prone ProteinsAmyloid-betaAlpha-synuclein

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/57506?article_type=v

Identifiering av liten molekyl-bindande proteiner i en Native Cellular miljö med Live-cell fotoaffinitetsmärkning
check_url/pt/57506?article_type=v

Lösa affinitetsrenat proteinkomplex av Blue Native PAGE och protein Korrelation profilering
check_url/pt/57506?article_type=v

Analysera superkomplex av den mitokondriella elektrontransportkedjan med naturliga elektrofores, in-gel-analyser och elektrolys
check_url/pt/57506?article_type=v

Fraktionering för upplösning av lösliga och olösliga Huntingtin arter
check_url/pt/57506?article_type=v

Fånga och identifiering av RNA-bindande proteiner med hjälp av klick kemi-assisted RNA-interactome Capture (CARIC) strategi
check_url/pt/57506?article_type=v

Användning av rekombinanta fusionsproteinerna i en fluorescerande proteas Assay plattform och deras i-gel utvinningsarbete
check_url/pt/57506?article_type=v

En strategi för att identifiera substanser som påverkar cell tillväxt och överlevnad i odlade däggdjursceller vid låg till måttlig genomströmning
check_url/pt/57506?article_type=v

Lokalisering av SUMO-modifierade proteiner med fluorescerande Sumo-fångst proteiner
check_url/pt/57506?article_type=v

Interaktioner med och membran permeabilisering av hjärnans Mitokona av amyloid fibriller
check_url/pt/57506?article_type=v

SUMO-bindande enheter (SUBEs) som verktyg för berikning, isolering, identifiering och karakterisering av SUMO Proteome i lever cancer

Read Article