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Benchtop immobilisé par chromatographie d’affinité métallique, Reconstitution et analyse d’un Polyhistidine tag métalloenzyme pour le laboratoire d’études de premier cycle
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Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory
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Benchtop immobilisé par chromatographie d’affinité métallique, Reconstitution et analyse d’un Polyhistidine tag métalloenzyme pour le laboratoire d’études de premier cycle

DOI:
10.3791/58012-v

•

08:02 min

•

August 23, 2018

•

,
1Department of Chemistry,Muhlenberg College

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:34Preparation of the IMAC Column
  • 01:42Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
  • 04:32Reconstitution of Target Protein with Fe2+
  • 06:43Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
  • 07:28Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Nous présentons ici un protocole de la purification par chromatographie AFFINITE métal benchtop immobilisé et réhydratation ultérieure d’un polyhistidine le tag, le fer non hémique liaison dioxygénase approprié pour le laboratoire d’enseignement de premier cycle.

Tags

Keywords: Benchtop Immobilized Metal Affinity ChromatographyPolyhistidine Tagged MetalloenzymeUndergraduate LaboratoryNon-heme Iron-binding EnzymesNickel-bound Nitriloacetic Acid ResinLysis Bind BufferCell-free Crude ExtractsFlow-throughEluent

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