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Benchtop मैटीरियल मेटल संबध क्रोमैटोग्राफी, पुनर्गठन और एक Polyhistidine की परख स्नातक प्रयोगशाला के लिए Metalloenzyme टैग
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Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory
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Benchtop मैटीरियल मेटल संबध क्रोमैटोग्राफी, पुनर्गठन और एक Polyhistidine की परख स्नातक प्रयोगशाला के लिए Metalloenzyme टैग

DOI:
10.3791/58012-v

•

08:02 min

•

August 23, 2018

•

,
1Department of Chemistry,Muhlenberg College

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:34Preparation of the IMAC Column
  • 01:42Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
  • 04:32Reconstitution of Target Protein with Fe2+
  • 06:43Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
  • 07:28Conclusion

Summary

Tadução automática

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यहां हम benchtop मैटीरियल मेटल संबध क्रोमैटोग्राफी शुद्धिकरण के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं और बाद में एक polyhistidine टैग की गई, गैर षयवस्तु लौह बंधन स्नातक शिक्षण प्रयोगशाला के लिए उपयुक्त dioxygenase ।

Tags

Keywords: Benchtop Immobilized Metal Affinity ChromatographyPolyhistidine Tagged MetalloenzymeUndergraduate LaboratoryNon-heme Iron-binding EnzymesNickel-bound Nitriloacetic Acid ResinLysis Bind BufferCell-free Crude ExtractsFlow-throughEluent

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