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ベンチトップ固定金属アフィニティー・クロマトグラフィー、再構成し、Polyhistidine のアッセイ学部の研究室の金属をタグ付き

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory

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ベンチトップ固定金属アフィニティー・クロマトグラフィー、再構成し、Polyhistidine のアッセイ学部の研究室の金属をタグ付き

DOI:

10.3791/58012-v

•

08:02 min

•

August 23, 2018

•

Keri L Colabroy, Katlyn Mayer

¹Department of Chemistry,Muhlenberg College

Capítulos

00:04Título
00:34Preparation of the IMAC Column
01:42Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
04:32Reconstitution of Target Protein with Fe²⁺
06:43Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
07:28Conclusion

Summary

Tadução automática

卓上型固定化金属親和性クロマトグラフィー精製タグ polyhistidine のそれに続く再構成のためのプロトコル、学部教育研究室に適した非ヘム鉄バインドジオキシゲナーゼを紹介します。

Tags

Keywords: Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography Polyhistidine Tagged Metalloenzyme Undergraduate Laboratory Non-heme Iron-binding Enzymes Nickel-bound Nitriloacetic Acid Resin Lysis Bind Buffer Cell-free Crude Extracts Flow-through Eluent

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