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벤치탑 움직일 금속 친화성 크로마토그래피, 재구성 및 학부 실험실의 분석 결과 Polyhistidine의 태그 Metalloenzyme

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory

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벤치탑 움직일 금속 친화성 크로마토그래피, 재구성 및 학부 실험실의 분석 결과 Polyhistidine의 태그 Metalloenzyme

DOI:

10.3791/58012-v

•

08:02 min

•

August 23, 2018

•

Keri L Colabroy, Katlyn Mayer

¹Department of Chemistry,Muhlenberg College

Capítulos

00:04Título
00:34Preparation of the IMAC Column
01:42Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
04:32Reconstitution of Target Protein with Fe²⁺
06:43Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
07:28Conclusion

Summary

Tadução automática

여기 우리가 현재 벤치탑 움직일 금속 친화성 크로마토그래피 정화 태그 polyhistidine의 후속 재구성에 대 한 프로토콜, 비 heme 철 바인딩 dioxygenase 학부 교육 실험실에 적합.

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Keywords: Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography Polyhistidine Tagged Metalloenzyme Undergraduate Laboratory Non-heme Iron-binding Enzymes Nickel-bound Nitriloacetic Acid Resin Lysis Bind Buffer Cell-free Crude Extracts Flow-through Eluent

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