Journal
/
Bioquímica
/
Benchtop imobilizada cromatografia de afinidade Metal, reconstituição e ensaio de um Polyhistidine Tagged Metalloenzyme para o laboratório de graduação
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory

Benchtop imobilizada cromatografia de afinidade Metal, reconstituição e ensaio de um Polyhistidine Tagged Metalloenzyme para o laboratório de graduação

DOI:
10.3791/58012-v

•

08:02 min

•

August 23, 2018

•

,
1Department of Chemistry,Muhlenberg College

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:34Preparation of the IMAC Column
  • 01:42Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
  • 04:32Reconstitution of Target Protein with Fe2+
  • 06:43Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
  • 07:28Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui nós apresentamos um protocolo para a purificação de cromatografia de afinidade metal benchtop imobilizada e posterior reconstituição de um polyhistidine com a tag, o ferro não-heme vinculação dioxigenase apropriado para o laboratório de ensino de graduação.

Tags

Keywords: Benchtop Immobilized Metal Affinity ChromatographyPolyhistidine Tagged MetalloenzymeUndergraduate LaboratoryNon-heme Iron-binding EnzymesNickel-bound Nitriloacetic Acid ResinLysis Bind BufferCell-free Crude ExtractsFlow-throughEluent

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/58012?article_type=v

Proteína de captura por afinidade complexos a partir de células de mamíferos Cryomilled
check_url/pt/58012?article_type=v

Biopanning semi-automático de exibição bacteriana bibliotecas para peptídeo afinidade reagente descoberta e análise dos isolados resultantes
check_url/pt/58012?article_type=v

Digestão de proteínas, ultrafiltração e cromatografia de exclusão para otimizar o isolamento do Exosomes do Plasma de sangue humano e soro
check_url/pt/58012?article_type=v

Análise de AtHIRD11 desordem intrínseca e ligação para íons metálicos por eletroforese em Gel capilar e afinidade de eletroforese capilar
check_url/pt/58012?article_type=v

Purificação e reconstituição de TRPV1 para análise espectroscópica
check_url/pt/58012?article_type=v

Enriquecimento de uma única etapa de um histone TAP-Tagged deacetilase do fungo filamentoso Aspergillus nidulans para o ensaio de atividade enzimática
check_url/pt/58012?article_type=v

Um ensaio de estabilidade de alvo responsivo de afinidade de drogas semiquantitativa (DARTS) para o estudo da interação Rapamycin/mTOR
check_url/pt/58012?article_type=v

Reconstituição detergente-assistida da Drosophila atlastin recombinante em lipossomas para ensaios de mistura de lipídios
check_url/pt/58012?article_type=v

Agarose reticulada ativada para o rápido desenvolvimento de resinas de cromatografia de afinidade-captura de anticorpos como um estudo de caso
check_url/pt/58012?article_type=v

Uma adaptação semi-high-throughput do ensaio ATPase NADH-acoplado para a seleção de inibidores pequenos da molécula

Read Article