Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse

Bu yöntem, akut ve kronik son dönem akciğer hastalığının tedavisi ile ilgili olanlar gibi pulmoner araştırma alanında anahtar soruların cevaplarına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, uzun süreli ekstrakorporeal membran oksijenasyonu sırasında çoklu organ hasarının moleküler ve patolojik mekanizmalarının başlamasını kolaylaştırmasıdır. Temiz, steril olmayan koşullar altında, 16x büyütme altında iki Fransız poliüretan kateter distal üçüncü içine üç fenestrations tanıtmak için bir cerrahi bıçak ve bir diseksiyon mikroskop kullanın.

Daha sonra, çıkış kanülini astar çözeltisine yerleştirin, peristaltik pompayı açarak ekstrakorporeal membran oksijenasyonunu veya ECMO makinesini dakikada bir milimetre lik akış hızında devreye sokun. 30 dakika sonra, oksijenatörüne dakikada 0,5 litre oksijen ekleyin ve anestezili yetişkin farede parmak ucuna tepki eksikliğini onaylayın. Hayvanın gözlerine merhem uyguladıktan sonra, boyun sol tarafında juguler ven görselleştirmek için dört milimetre lateral deri kesi yapmak, ve daha fazla damar ortaya çıkarmak için mikro-forceps ve pamuk lu bezler kullanın.

8-0 kullanın maruz kalan ven distal ucunu ligate için ipek dikiş, ve proksimal sonunda bir kayma düğüm yerleştirin. Mikrosaçıkarıcı larla damarın ön duvarını yerleştirin ve 26-gauge branula ile juguler vene gram başına 2,5 uluslararası birim enjekte edin, ekleme sırasında aşırı kan kaybını önlemek için cerrahi pedin baş ucunu 30 derece yükseltin. Dikkatle juguler ven proksimal sonuna fenestrated iki Fransız poliüretan kanül eklemek, biraz kanül dönen, inferior vena kava illiac bifurcation ulaşmak için dört santimetre derinliğe kanül iterek.

Kanülleri çok nazikçe itmek önemlidir, ama sürekli olarak ekstra güç kullanmadan. Dirençle karşılaşılırsa, kanülleri geri çekin ve tekrar takın. 8-0 ile kanül güvenli ipek düğümleri, ve sadece gösterildiği gibi sağ juguler ven ortaya.

Bir Fransız poliüretan kanül ile sağ juguler ven kanül, yavaşça sağ atriyum doğru kanül beş milimetre hareket ve 8-0 ile kanül güvenli ipek düğümler. İnvaziv basınç izleme ve kan gazı analizi için başka bir Fransız poliüretan kanül ile sol femoral arter kateterize, ve elektrokardiyogram iğneler deri altı her iki forelimbs içine bir veri toplama cihazına bağlı eklemek, ve sol torasik duvara. Ardından bir veri toplama cihazına bağlı bir rektal termometre takın.

Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonunu başlatmak için pompayı dakikada 0,1 mililitrelik başlangıç akış hızına çevirin. İki dakika sonra, akış hızını dakikada üç ila beş mililitreye ayarlayın. Kararlı akış altında, gerçek zamanlı modda veri toplama cihazı üzerinden hayati parametreleri izlemek, sürekli venöz drenaj geri akışını kontrol, ve hava trapper rezervuar kan düzeyini izleme.

Herhangi bir kan sızıntısı toplamak için 24-gauge branula ile donatılmış bir mililitreşşük şırınga kullanın ve hava yakalama rezervuarı üzerinden ECMO devresine kan dönmek. Kan gazı analizi için, ECMO inisiyasyonundan 10 dakika sonra, inferior vena kavadan oksijenatordan önce, oksijenatörün hemen ardından ve femoral arterden yaklaşık 75 mikrolitre arteriyel kan toplamak için bir kan örnekleme kartuşunu kullanın. ECMO inisiyasyonundan 30 ve 60 dakika sonra, sadece femoral arterden kan toplayın.

Başlama işleminden 45 ve 90 dakika sonra, hava trapper'ı aracılığıyla intravasal sıvı kaybını telafi etmek için 0,1 mililitre astar çözeltisi uygulayın. Başladıktan iki saat sonra, oksijenatörü, inferior vena kava ve femoral arterkan toplamak. Son kan toplama sonra, beş dakika boyunca pompa akış hızını azaltmak, bu nedenle ECMO durdurma, başka bir 10 dakika için hayati parametreleri kaydetmeye devam ederken.

Tipik bir deneyde, hayvanın fizyolojik parametreleri her 10 dakikada bir kaydedilir. Bu temsili deneyde, hematolojik parametreler ECMO sırasında ilgili bir hemodilüsyon gösterdi, ancak orta derecede anemiyi telafi etmek için kan transfüzyonu gerekli değildi. Oksijenleme parametreleri, oksijen hava karışımında 1.0 oksijenin çok küçük bir kısmında uygun bir oksijenatörü performansı sergiledi.

Ayrıca, ECMO sırasında metabolik değişiklikler başlangıçta ve deneyin sonunda solunum alkaloz dahil. Ekstra kan tamponlama yapılmadı. ECMO devresi üzerinden kan akışını absorbe etmek, kan gazı analizi yoluyla oksijenlenme parametrelerini izlemek ve kan örneklemesinin neden olduğu kan kaybını ekstra astar lama solüsyonu ile değiştirmek için uygun kanülasyon tekniğini kullanmak önemlidir.

Bu teknik, akciğer hastalığı alanında araştırmacılar ın 80'den fazla kullanılabilir knock-in, knock-out fare modeli kullanarak hayat kurtaran tedaviler için protokolleri önemli ölçüde iyileştirmelerinin önünü açıyor.